Science Advances》 恭贺上海交通大学杨广宇研究团队在酶定向进化的超高通量筛选领域发表最新研究结果

文章简介

        自然界的岩藻糖基化反应由岩藻糖基转移酶(Fucosyltransferases,FucTs)催化,这类酶的催化活性通常较低,极大的限制了岩藻糖类的大规模应用。酶定向进化技术通过在实验室中模拟自然进化的过程,可以有效改善酶的性能,在酶工程领域的重要作用,于2018年获得了诺贝尔化学奖。然而,由于岩藻糖基转移酶的反应难以用常规实验方法进行高通量筛选,对这类酶的定向进化改造一直没有取得突破。他们巧妙的利用了细胞膜表面的半乳糖透酶(LacY基因)对底物及糖基化产物通透性的差异,建立了可以利用流式细胞仪在单细胞层面对FucTs进行活性检测的FACS筛选体系,速度达到每小时1000万克隆以上,一举打破了这类酶的筛选瓶颈。

该研究建立了首个针对岩藻糖基化酶的单细胞超高通量筛选技术平台,并解析了GT-B型糖基转移酶催化调控的机制,为其它糖基转移酶的分子改造提供了重要的工具和指导,有望促进糖生物技术领域的进步和重要寡糖产品的生物催化产业发展。

论文链接:https://doi.org/10.1126/sciadv.aaw8451

相关产品

        在该研究过程中,科研人员使用了李记生物自主研发的两款特色产品:

1、Pikogreen dsDNA定量试剂盒(超敏)(兼容Qubit 3.0)货号:AN54L038

2、GelRed 核酸染料(500μL in water, 10,000 X)货号:AN34L022


                                                                        ——以上图片截自期刊

相关产品介绍

       (一)无毒核酸染料货号:AN34L022

        易用性:可完全替代EB,无须改变任何操作习惯,支持前染(制胶过程中加入)、后染(配制染胶溶液),更支持胶回收使用,紫外照射不易淬灭、不易降解;

        安全性:GelRed/GelGreen是花箐素染料,为油性大分子,且带有大量与细胞膜同性质电荷,几乎无细胞渗透性;

Hela细胞与1 X SYBR GreenⅠ,李记GelRed及GelGreen在室温下孵育一小时,用Olympus荧光显微镜观察并拍照,与SYBR GreenⅠ孵育的细胞显示出绿色荧光,表明染料已透过细胞膜进入细胞并与核酸结合。李记GelRed,及李记GelGreen未显示荧光,说明染料未能透过细胞膜进入细胞。结果见上图。

      灵敏度:染色效果优于SYBR GreenI;背景噪音信号也要低于EB。

      (二)Pikogreen dsDNA定量试剂盒货号:AN54038

与传统DNA定量方法相比,该产品具有检测范围广、高灵敏度、高特异性等优点。试剂盒主要包含Pikogreen High Sensitivity dsDNA Quantitation Buffer, Enhancer solution以及pre-diluted dsDNA Standards三个组分。

此外,试剂盒还可以将其他污染物的影响降低至最低,可以耐受常规污染物例如蛋白质,盐,有机溶剂和洗涤剂等,该试剂盒不具有细胞膜通透性,没有细胞毒性和诱发突变性,对人体安全无害。

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科研奖金300元/分(京东卡)

文章奖励的细则

 1、须在正文材料与方法中注明产品购自上海李记生物科技有限公司,格式依据SCI 期刊的要求而定,我司英文名称为: Shanghai Life-iLab Biotech Co., Ltd;期刊中带有(Life-iLab, China);(Life-iLab, Shanghai, China)。

 例如:Cell Counting Kit-8(Life-iLab, Shanghai, China)

  2、SCI期刊影响因子(IF)以文章见刊时点数的为准;

  3、同一篇文章只能申请一次奖励;同一作者只能申请IF分值最高的SCI文章的奖励;

  4、申请人需为第一作者,申请时间为2019年1月1日至2020年12月31日。申请人应确保提交信息的真实有效,若有提交虚假信息,假冒原著作者身份,或因抄袭、造假被撤稿等行为,申请人需退还所有奖励金并承担一切相关法律责任。

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