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  李记生物细胞增殖系列上新啦!为满足不同客户的需求,特推出EdU系列文末开学季CCK-8限时大促!惊爆价+加赠好礼!点击抽奖即有机会得600元海底捞劵(0门槛)!

  下文是细胞增殖及细胞活力检测方法介绍,快来看看吧!

新品简介

  李记生物EdU检测试剂盒,可以高效快速的检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究   不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免样品损伤,而且无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。

产品优势 

  1. 准确:与BrdU方法相比,EdU检测不需要DNA变性,不需要抗原修复,不需要抗原抗体反应。
  2. 灵敏:EdU细胞增殖检测可以直接并准确地检测出新DNA的合成。
  3. 便捷:能够与各种抗体或荧光蛋白同时标记,以检测细胞其他性状特征。

 

案例图示

检测方法

1.DNA合成检测——BrdU / EdU检测法

  细胞在增殖过程中,DNA的倍增,是最显著的变化之一,通过检测DNA量的变化,可判断细胞数量的变化。

  EdU检测法是BrdU的替代方法,也是目前更广泛适用的方法,RrdU需抗体在破开DNA双联后与抗原分子集合后才能显示,这个处理过程对细胞有损伤,而EdU同样可以代替胸腺嘧啶(T)渗入DNA,但其分子大小只有BrdU的1/500,可以直接在DNA双链形态下与染料分子结合用于检测,无需抗体结合反应,实验过程简单,对细胞损伤小,是新一代基于DNA检测时报增殖的试剂。

 

2.代谢活性物质检测——MTT、CCK8

  CCK8中的主要物质WST-8是一种类似于MTT(对细胞有损伤)的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的琥珀酸脱氢酶还原生成橙黄色的、水溶性formazan。细胞增殖越多越快,则颜色越深;反之,则颜色越浅。CCK-8对细胞基本无毒性,可进行活细胞动态测定,试剂稳定即开即用,重复性好于MTT。

 

3.羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)检测法

  羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)是一种可穿透细胞膜的荧光染料, CFSE进入细胞后可以不可逆地与细胞内的氨基结合偶联到细胞蛋白质上。当细胞分裂时,CFSE标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,子代细胞荧光强度是亲代细胞的一半,在一个增殖的细胞群中,各连续代细胞的荧光强度递减,利用流式细胞仪在488nm激发光和荧光检测通道可对其进行分析。

 

4.ATP浓度检测

  细胞内的ATP是细胞能量的重要来源,其含量与细胞周期和细胞状态关系密切,死细胞或濒临死亡的细胞几乎不含ATP。利用荧光素酶Luciferase及其底物荧光素Luciferin的ATP检测以生物发光为基础,能够为您提供非常灵敏的结果,这种方法非常适用于高通量细胞增殖检测和筛选。

 

5.细胞增殖相关抗原检测

  Ki-67,PCNA都是细胞增殖因子,在细胞异常增殖中均有显著的表达差异,是研究肿瘤细胞增殖的重要核抗原。Ki-67,PCNA均与细胞周期密切相关,通过免疫反应检测Ki-67,PCNA可反应肿瘤细胞增殖情况。

 

细胞增殖/活性检测方法比较,常见细胞增殖/活性检测方法比较见下表(含李记生物产品、货号)

 

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注意事项:

  • 活动时间:2022.8.22-2022.9.16
  • 活动范围:全国生物相关终端客户
  • 活动编号:Li220822I
  • 所有活动均需关注李记微信公众号