产品名称:活性检测CCK-8细胞增殖与毒性检测试剂盒
型       号:D3100L4053
规       格:1ml(100T)
申请方式:微信留言
申请名额:前100 名
  Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 细胞增殖与活性检测试剂盒是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。其主要成分为水溶性四唑盐WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性的甲臜(formazan 参考图1)。WST-8 被细胞内脱氢酶生物还原后生成的甲臜能够直接溶解在培养基中。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
                                             图1:WST-8分子结构及检测原理

 

实验操作方法

1. 在96孔板中配制100 μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时 (在37℃,5% CO2的条件下)。
2. 向培养板加入10 μl不同浓度的待测物质。如果测定细胞活性,则不需要2-3步骤,直接从第四步操作。
3. 将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,  12, 24或48小时)。
4. 向每孔加入10 μl CCK-8溶液 (注意不要在孔中生成气泡,它们会影响O.D值的读数)。
5. 将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
6. 用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。

 

温馨提示

  在实验操作中,有遇见任何问题可以拨打电话:021-50778506或者直接微信联系,8:30-17:00为您服务!
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