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每月一星,免费赠送:本期产品——GelRed 核酸染

 产品名称:GelRed 核酸染料

                  (500μL in  water, 10,000 X)

 型       号:C1001L1122

 规       格:20ul

 申请方式:私信留言

 申请名额:前100 名

一、 李记GelRed——李记生物自主研发的一款新型的核酸染料。

       据不完全统计,有强烈致癌、致畸作用的EB染料仍以90%的绝对优势占据核酸染料使用量榜首,在众多的EB替代染料中,名气最大的要数Life公司的SYBR系列、美国Biotium公司的GelRed染料,其他替代染料要么是EB,吖啶橙改名,要么是国内不成熟的仿品,安全性毫无保障。Life公司的SYBR Green,SYBR Goad, SYBR Safe严格意义上来讲,不能称作安全染料。Biotium公司的GelRed是一款真正意义上的安全染料,染色效果也好,但价格奇高,做一块50ml的琼脂糖凝胶,染料成本接近8元!

       2015年,李记生物经长期研发,开发成功国产GelRed染料。这款产品全面优于SYBR系列染料,在灵敏度、荧光强度、稳定性等方面甚至优于原创厂家Biotium公司产品(见图1.),而价格仅为原厂2/3。


图1:I、Hela细胞与SYBR Green,李记GelRed在室温下孵育一小时,用Olympus荧光显微镜观察并拍照,与SYBR Green孵育的细胞显示出绿色荧光,表明染料已透过细胞膜进入细胞并与核酸结合。李记GelRed未显示荧光,说明李记染料未能透过细胞膜进入细胞。

II、SYBR Green,李记GelRed染料相同DNA浓度下染色效果。


图2:几种核酸染料比较

二、实验操作方法

1.胶染法(用法同EB)

(1)制胶时加入GelRed核酸染料(例如:每50mL琼脂糖溶液中加入5μL GelRed 10,000×储液,以此比例类推)。

(2)按照常规方法进行电泳。 注意事项: 此方法染色染料用量相对较少,500 μL染料大约可以做100块50 mL的胶。 由于GelRed具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将GelRed储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。GelRed兼容所有常用的电泳缓冲溶液。 含有染料的预制凝胶溶液可以大量制备,并长期保存直到使用。 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。 

2.泡染法 

(1)按照常规方法进行电泳。 

(2)用H2O将GelRed 10,000×储液稀释约3,300倍到0.1 M NaCl中,制成3×染色液。(例如将15μL GelRed 10,000×储液和5 mL 1 M NaCl加到45 mL H2O中)。 

(3)将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中,缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶,室温振荡染色30 min左右,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30 min到1 h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。

温馨提示:

       在实验操作中,有遇见任何问题可以拨打电话:4006-343-858或者直接微信联系,8:30-17:00为您服务!

        李记生物用诚信来对待每一次服务!用产品的质量回馈每一位客户!感谢微信圈有您!祝一切顺利!

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