分子生物学
细胞生物学
染料/探针/标记
蛋白电泳
产品名称 |
货号 |
规格 |
保存 |
价格 |
活性检测CCK-8细胞增殖与毒性检测试剂盒 |
AC11L053 |
100T(1ml) |
-20℃ |
158 |
Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 细胞增殖与活性检测试剂盒是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。其主要成分为水溶性四唑盐WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性的甲臜(formazan,参考图1)。WST-8 被细胞内脱氢酶生物还原后生成的甲臜能够直接溶解在培养基中。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
图1:WST-8分子结构及检测原理
运输与保存方法:
冰袋运输。CCK-8在4℃可保存一年,在-20℃可以存放数年,反复冻融会造成测定背景O.D值升高,如经常使用,建议存放于4℃即可。
操作方法:
1. 在96孔板中配制100 μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时 (在37℃,5% CO2的条件下)。
2. 向培养板加入10 μl不同浓度的待测物质。如果测定细胞活性,则不需要2-3步骤,直接从第四步操作。
3. 将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6, 12, 24或48小时)。
4. 向每孔加入10 μl CCK-8溶液 (注意不要在孔中生成气泡,它们会影响O.D值的读数)。
5. 将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
6. 用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
注意事项:
1)CCK-8试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化反应,如果待检测体系中有较多还原剂(或抗氧化剂)会造成背景O.D值升高,干扰检测结果。如果实验中有还原剂,请检查背景的O.D值,即测定、比较空白培养基加入药物与不加药物的培养基(含细胞)在加入CCK- 8试剂后的O.D值,如果空白O.D值明显偏高,则说明有反应,应设法去除或折算干扰因素。
2)如果细胞培养时间较长,培养基颜色发生变化,应洗涤细胞更换培养基后再加CCK-8检测。细胞培养基酚红不影响测定结果。
3)为使CCK-8试剂盒培养基充分混匀,减少CCK-8在移液器上的残留,建议加样前用培养基稀释CCK-8试剂,混匀后加样。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
CCK-8与同类试剂比较
检测方法 |
MTT法 |
XTT法 |
WST-1法 |
CCK法 |
产品性状 |
粉末 |
2瓶溶液 |
溶液 |
1瓶溶液 |
使用方法 |
配成溶液后使用 |
现配现用 |
即开即用 |
即开即用 |
检测灵敏度 |
高 |
很高 |
很高 |
高 |
检测时间 |
较长 |
较短 |
较短 |
最短 |
检测波长 |
560-600nm |
420-480nm |
420-480nm |
430-490nm |
细胞毒性 |
高,细胞形态完全消失 |
很低,细胞形态不变 |
很低,细胞形态不变 |
很低,细胞形态不变 |
试剂稳定性 |
一般 |
较差 |
一般 |
很好 |
批量样品检测 |
可以 |
非常适合 |
非常适合 |
非常适合 |
便捷程度 |
一般 |
便捷 |
便捷 |
非常便捷 |
产品名称 |
货号 |
规格 |
价格 |
活性检测CCK-8细胞增殖与毒性检测试剂盒 |
AC11L053 |
100T |
158 |
AC11L054 |
500T |
595 |
|
AC11L055 |
1000T |
1050 |
|
AC11L056 |
3000T |
2080 |
|
AC11L057 |
10000T |
5850 |