Cell Counting Kit(CCK-8 试剂盒)

产品货号:

AC11L054

产品规格:

500T/10000T

产品价格:

480/1800

产品描述

Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒),是一种基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度的比色检测试剂盒。检测原理为:WST-8在电子耦合剂1-Methoxy PMS存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性的甲臜(formazan,参考图1),生成的甲臜的颜色深浅与细胞增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450nm 波长处测定OD 值,间接反映活细胞数量。

本试剂盒可用于细胞增殖测定,细胞毒性的检测,药物筛选,以及细胞生长抑制检测等。

图1:WST-8分子结构及检测原理

订购信息

产品名称 货号 规格 价格
Cell Counting Kit(CCK-8 试剂盒) AC11L054 500T( 5 mL) 480
Cell Counting Kit(CCK-8 试剂盒) AC11L054 20*500T(5mL) 1800

运输与保存

蓝冰运输。-20℃保存,有效期24个月。【注】:反复冻融会造成测定背景OD值升高。

使用方法

  1. 以96孔板为例,96孔板中每孔接种100 μL的细胞悬液,在细胞培养箱预培养24 h。
  2. 向每孔加入10 μL不同浓度的待测物质。如果仅测定细胞活性,则不需要2~3步骤,直接从第四步操作。
  3. 将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(依据待测药物而定)。
  4. 向每孔加入10 μL CCK-8溶液 (注意不要产生气泡,轻轻混匀)。
  5. 将培养板在培养箱内孵育适当时间(一般5~2 h)。
  6. 酶标仪测定450 nm处的吸光值。

注意事项

  1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
  2. 建议调试合适的接种细胞的数量和加入CCK-8溶液后培养的时间。当使用标准96 孔板时,贴壁细胞至少1000 个/ 孔(100 μL 培养基),白细胞至少2500 个/ 孔(100 μL 培养基)。建议实验前设定几个不同细胞数量的梯度孔进行条件测试,细胞培养时间和处理方法根据实验情况而定,加入CCK-8溶液后(加入体积为每孔细胞培养液体积的10%),在37℃细胞培养箱中孵育,不同时间点后测450 nm处的吸光值(CCK-8敏感性高,一些细胞0.5 h后就可以测定第一次)。
  3. CCK-8试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化反应,如果待检测体系中有较多还原剂(或抗氧化剂)会造成背景OD值升高,干扰检测结果。如果实验中有还原剂,请检查背景的OD值,设法先去除还原剂干扰。例如,可在加入CCK-8溶液之前更换新鲜的培养基,以去除待测药物的影响。当待测药物影响比较小时,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入待测药物后的空白吸收即可。
  4. 进行药物抑制实验时,如果药物中含有金属,如Pb2+、Fe2+、Cu2+等金属会对CCK-8 Solution的显色反应产生影响,从而导致检测的灵敏度降低。
  5. 如果细胞培养时间较长,培养基颜色发生变化,应洗涤细胞更换培养基后再加CCK-8检测。细胞培养基酚红不影响测定结果。
  6. 为使CCK-8试剂盒培养基充分混匀,减少CCK-8在移液器上的残留,建议加样前用培养基稀释CCK-8试剂,混匀后加样。
  7. 若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入0.1 M 的HCL 溶液或者1% w/v SDS 溶液,室温避光保存,24 h 内检测,吸光度不会受到影响。(加入1% SDS 溶液的体积与加入CCK-8溶液的体积相同)。
  8. 如果吸光值很低,可以适当增加细胞数量或者延长加入CCK-8溶液后孵育的时间。
  9. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

CCK-8法的优势

检测方法 MTT法 XTT法 WST-1法 CCK-8法
产品性状 粉末 2瓶溶液 溶液 1瓶溶液
使用方法 配成溶液后使用 现配现用 即开即用 即开即用
检测灵敏度 很高 很高
检测时间 较长 较短 较短 最短
检测波长 560-600nm 420-480nm 420-480nm 430-490nm
细胞毒性 高,细胞形态完全消失 很低,细胞形态不变 很低,细胞形态不变 很低,细胞形态不变
试剂稳定性 一般 较差 一般 很好
批量样品检测 可以 非常适合 非常适合 非常适合
便捷程度 一般 便捷 便捷 非常便捷

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产品规格:

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产品价格:

480/1800

产品描述

Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒),是一种基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度的比色检测试剂盒。检测原理为:WST-8在电子耦合剂1-Methoxy PMS存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性的甲臜(formazan,参考图1),生成的甲臜的颜色深浅与细胞增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450nm 波长处测定OD 值,间接反映活细胞数量。

本试剂盒可用于细胞增殖测定,细胞毒性的检测,药物筛选,以及细胞生长抑制检测等。

图1:WST-8分子结构及检测原理

订购信息

产品名称 货号 规格 价格
Cell Counting Kit(CCK-8 试剂盒) AC11L054 500T( 5 mL) 480
Cell Counting Kit(CCK-8 试剂盒) AC11L054 20*500T(5mL) 1800

运输与保存

蓝冰运输。-20℃保存,有效期24个月。【注】:反复冻融会造成测定背景OD值升高。

使用方法

  1. 以96孔板为例,96孔板中每孔接种100 μL的细胞悬液,在细胞培养箱预培养24 h。
  2. 向每孔加入10 μL不同浓度的待测物质。如果仅测定细胞活性,则不需要2~3步骤,直接从第四步操作。
  3. 将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(依据待测药物而定)。
  4. 向每孔加入10 μL CCK-8溶液 (注意不要产生气泡,轻轻混匀)。
  5. 将培养板在培养箱内孵育适当时间(一般5~2 h)。
  6. 酶标仪测定450 nm处的吸光值。

注意事项

  1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
  2. 建议调试合适的接种细胞的数量和加入CCK-8溶液后培养的时间。当使用标准96 孔板时,贴壁细胞至少1000 个/ 孔(100 μL 培养基),白细胞至少2500 个/ 孔(100 μL 培养基)。建议实验前设定几个不同细胞数量的梯度孔进行条件测试,细胞培养时间和处理方法根据实验情况而定,加入CCK-8溶液后(加入体积为每孔细胞培养液体积的10%),在37℃细胞培养箱中孵育,不同时间点后测450 nm处的吸光值(CCK-8敏感性高,一些细胞0.5 h后就可以测定第一次)。
  3. CCK-8试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化反应,如果待检测体系中有较多还原剂(或抗氧化剂)会造成背景OD值升高,干扰检测结果。如果实验中有还原剂,请检查背景的OD值,设法先去除还原剂干扰。例如,可在加入CCK-8溶液之前更换新鲜的培养基,以去除待测药物的影响。当待测药物影响比较小时,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入待测药物后的空白吸收即可。
  4. 进行药物抑制实验时,如果药物中含有金属,如Pb2+、Fe2+、Cu2+等金属会对CCK-8 Solution的显色反应产生影响,从而导致检测的灵敏度降低。
  5. 如果细胞培养时间较长,培养基颜色发生变化,应洗涤细胞更换培养基后再加CCK-8检测。细胞培养基酚红不影响测定结果。
  6. 为使CCK-8试剂盒培养基充分混匀,减少CCK-8在移液器上的残留,建议加样前用培养基稀释CCK-8试剂,混匀后加样。
  7. 若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入0.1 M 的HCL 溶液或者1% w/v SDS 溶液,室温避光保存,24 h 内检测,吸光度不会受到影响。(加入1% SDS 溶液的体积与加入CCK-8溶液的体积相同)。
  8. 如果吸光值很低,可以适当增加细胞数量或者延长加入CCK-8溶液后孵育的时间。
  9. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

CCK-8法的优势

检测方法 MTT法 XTT法 WST-1法 CCK-8法
产品性状 粉末 2瓶溶液 溶液 1瓶溶液
使用方法 配成溶液后使用 现配现用 即开即用 即开即用
检测灵敏度 很高 很高
检测时间 较长 较短 较短 最短
检测波长 560-600nm 420-480nm 420-480nm 430-490nm
细胞毒性 高,细胞形态完全消失 很低,细胞形态不变 很低,细胞形态不变 很低,细胞形态不变
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批量样品检测 可以 非常适合 非常适合 非常适合
便捷程度 一般 便捷 便捷 非常便捷

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