Alexa Fluor 555 标记鬼笔环肽(橘色)

产品货号:

AC18L022

产品规格:

300T

产品价格:

1950

产品描述

鬼笔环肽是从一种菌类Amanita Dhalloides所提取出来的环肽。它与F-actin竞争性的结合。荧光标记的鬼笔环肽在纳克水平就可与F-actin选择性的结合并且易溶于水,为检测组织切片,培养细胞和无细胞体系中的actin的定位和定量提供了非常方便的标记方法。

本品为Alexa Fluor 555标记的鬼笔环肽,可发出高亮度、稳定的橘色荧光,染色反应特异性强,对比性高,适合用作F-actin的定性和定量检测。与Actin抗体比较,Alexa Fluor 555鬼笔环肽具有如下优点:(1)与actin亚单位一比一结合,并且不与G-actin结合,具有比Actin抗体更好的染色效果。(2)且本品的结合没有物种差异性,适用性广泛。(3)鬼笔环肽标记的非特异性信号可忽略,因而图像的反差较好。(4)染色与用于细胞分析的其他荧光染色完全兼容,包括荧光蛋白、Qdot® 纳米晶体和其他Alexa Fluor偶联物(包含Alexa Fluor偶联二抗)。(5)经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。

技术资料

  1. Ex(nm):556
  2. Em(nm):574
  3. 分子量:约1300
  4. 溶剂:DMSO
  5. 结构式:

订购信息

产品名称

货号

规格

价格

 Alexa Fluor 555 标记鬼笔环肽(橘色)

AC18L022 

300 T

1950

运输与保存

蓝冰运输。-20℃避光干燥保存,有效期12个月。【注】:避免反复冻融。

使用方法

  1. 1. 准备1× Alexa Fluor 555标记鬼笔环肽工作液

吸取1 μL 1000×Alexa Fluor 555标记鬼笔环肽存储液到1 mL含有1%BSA的PBS缓冲液中即可得到1×工作液。

【注】:不同的细胞染色情况不同,相应Alexa Fluor555鬼笔环肽使用量也需根据不同情况而定。

  1. 2. 细胞染色步骤

(1)细胞培养过夜或更长,使其密度达到50~60%汇合度。

(2)吸掉培养液,37℃预热的1×PBS(pH 7.4)清洗细胞2次。

(3)使用含有3~4%甲醛的PBS溶液进行细胞固定,室温固定10~30 min。

【注】:避免固定剂中含有甲醇成分,因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。

(4)室温条件下,用PBS清洗固定好的细胞2~3次,每次10 min。

(5)(可选):室温条件下,用溶于PBS的0.1% Triton X-100溶液透化处理3~5 min,从而增加其通透性。

【注】:鬼笔环肽的分子量小,很容易通过细胞,一般情况下不需对细胞进行冷丙酮和TRITON X-100处理。

(6)室温条件下,用PBS清洗细胞2~3次,每次10 min。

(7)每孔加入 Alexa Fluor 555标记鬼笔环肽工作液100 μL/孔(96孔板),室温避光染色20~90 min,夏季时间相对短些。

(8)用PBS清洗细胞3次,每次5 min,去除掉多余的Alexa Fluor 555标记鬼笔环肽。

(9)(可选):加入足量的即用型DAPI溶液对细胞核进行复染,如:100 μL/孔(96孔板),室温3~5 min。用PBS清洗细胞2次,每次5 min。

(10)于荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察,选择Alexa FluorTM 555激发/发射滤片(Ex/Em=556/574 nm)和/或DAPI激发/发射滤片(Ex/Em=364/454 nm)。

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鬼笔环肽是从一种菌类Amanita Dhalloides所提取出来的环肽。它与F-actin竞争性的结合。荧光标记的鬼笔环肽在纳克水平就可与F-actin选择性的结合并且易溶于水,为检测组织切片,培养细胞和无细胞体系中的actin的定位和定量提供了非常方便的标记方法。

本品为Alexa Fluor 555标记的鬼笔环肽,可发出高亮度、稳定的橘色荧光,染色反应特异性强,对比性高,适合用作F-actin的定性和定量检测。与Actin抗体比较,Alexa Fluor 555鬼笔环肽具有如下优点:(1)与actin亚单位一比一结合,并且不与G-actin结合,具有比Actin抗体更好的染色效果。(2)且本品的结合没有物种差异性,适用性广泛。(3)鬼笔环肽标记的非特异性信号可忽略,因而图像的反差较好。(4)染色与用于细胞分析的其他荧光染色完全兼容,包括荧光蛋白、Qdot® 纳米晶体和其他Alexa Fluor偶联物(包含Alexa Fluor偶联二抗)。(5)经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。

技术资料

  1. Ex(nm):556
  2. Em(nm):574
  3. 分子量:约1300
  4. 溶剂:DMSO
  5. 结构式:

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蓝冰运输。-20℃避光干燥保存,有效期12个月。【注】:避免反复冻融。

使用方法

  1. 1. 准备1× Alexa Fluor 555标记鬼笔环肽工作液

吸取1 μL 1000×Alexa Fluor 555标记鬼笔环肽存储液到1 mL含有1%BSA的PBS缓冲液中即可得到1×工作液。

【注】:不同的细胞染色情况不同,相应Alexa Fluor555鬼笔环肽使用量也需根据不同情况而定。

  1. 2. 细胞染色步骤

(1)细胞培养过夜或更长,使其密度达到50~60%汇合度。

(2)吸掉培养液,37℃预热的1×PBS(pH 7.4)清洗细胞2次。

(3)使用含有3~4%甲醛的PBS溶液进行细胞固定,室温固定10~30 min。

【注】:避免固定剂中含有甲醇成分,因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。

(4)室温条件下,用PBS清洗固定好的细胞2~3次,每次10 min。

(5)(可选):室温条件下,用溶于PBS的0.1% Triton X-100溶液透化处理3~5 min,从而增加其通透性。

【注】:鬼笔环肽的分子量小,很容易通过细胞,一般情况下不需对细胞进行冷丙酮和TRITON X-100处理。

(6)室温条件下,用PBS清洗细胞2~3次,每次10 min。

(7)每孔加入 Alexa Fluor 555标记鬼笔环肽工作液100 μL/孔(96孔板),室温避光染色20~90 min,夏季时间相对短些。

(8)用PBS清洗细胞3次,每次5 min,去除掉多余的Alexa Fluor 555标记鬼笔环肽。

(9)(可选):加入足量的即用型DAPI溶液对细胞核进行复染,如:100 μL/孔(96孔板),室温3~5 min。用PBS清洗细胞2次,每次5 min。

(10)于荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察,选择Alexa FluorTM 555激发/发射滤片(Ex/Em=556/574 nm)和/或DAPI激发/发射滤片(Ex/Em=364/454 nm)。

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