BCA蛋白定量试剂盒

产品货号:

AP12L025/AP12L026

产品规格:

500T/2500T

产品价格:

368/1398

产品描述

李记生物研制的BCA蛋白定量试剂盒可对蛋白质溶液进行高灵敏度比色定量,本试剂盒不受蛋白质种类的影响。BCA(bicinchoninic acid)是一种稳定的水溶性复合物,在碱性条件下,二价铜离子(Cu2+)可以被蛋白质还原成一价铜离子(Cu+),一价铜离子可以和BCA相互作用,两分子的BCA螯合一个一价铜离子,形成紫色的络合物,该复合物为水溶性,在562nm处显示强吸光性,在0.02~2 mg/mL浓度范围内蛋白质浓度与吸光度值成线性关系,因此可以根据待测蛋白在562 nm处的吸光度计算待测蛋白浓度。

由于还原剂和螯合剂对反应有阻碍,因此本制品不适用于含有还原剂(如:β-巯基乙醇,DTT等)或者螯合剂(如EDTA)的蛋白质样品的定量。对表面活性剂的干扰影响小。可用于含有表面活性剂蛋白质溶液的定量。

订购信息

产品名称

货号

规格

价格

BCA蛋白定量试剂盒

AP12L025

500T

368

BCA蛋白定量试剂盒

AP12L026

2500T

1398

产品组分

产品

产品组

产品规格

AP12L025

BCA试剂 A

100 mL

BCA试剂 B

4 mL

蛋白标准(5 mg/mL BSA)

1 mL

产品说明书

一份

AP12L026

BCA试剂 A

250 mL×2

BCA试剂 B

20 mL

蛋白标准(5 mg/mL BSA)

1 mL×5

产品说明书

一份

运输与保存

蓝冰运输。BCA试剂A和B室温保存,蛋白标准请-20℃保存,有效期12个月。

使用方法

  1. 完全融化蛋白标准品,取适量蛋白标准品稀释至终浓度为5mg/mL。蛋白样品使用什么溶液溶解,标准品也应用什么溶液稀释,但是为了简便起见,也可以用0.9% NaCl或PBS稀释标准品。将标准品按0、1、2、4、8、12、16、20 μL加到96孔板的标准品孔中,加标准品稀释液补足到20 μL,相当于标准品浓度分别为0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/mL。
  2. 根据样品数量,按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液,充分混匀。例如5mL BCA试剂A加100 μL BCA试剂B,混匀,配制成5.1ml BCA工作液。 BCA工作液室温24 h内稳定。
  3. 加适当体积样品到96孔板的样品孔中,也加稀释液到20μL。
  4. 各孔加入200μL BCA工作液,37℃放置20~30 min。也可以室温放置2 h,或60℃放置30 min。
  5. 测定A562吸光值,540~595nm之间的波长也可接受。根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。

注意事项

  1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
  2. 蛋白标准品配制后可立即使用,也可以-20℃长期保存。
  3. BCA法测定蛋白浓度时,颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高温度孵育或适当延长孵育时间以获得更好检测效果。
  4. 因为延长孵育时间会引起吸光值的变化,所以在用紫外分光光度计检测时,应尽可能加快检测速度,以免先检后检产生系统误差。
  5. 标准蛋白液的加量应当准确,如果加量不准确,会导致制作出来的标准曲线出现偏差,影响待测样品的浓度计算,所以一方面需要用梯度稀释的方法来配置标准蛋白液,另一方面应使用精确度高的移液枪。

 

Bradford法与BCA法的对比

方法

Bradford法

BCA法

灵敏度

1~5 μg

0.5~20 μg

时间

5~15 min

40~60 min

波长

595 nm

562 nm

检测不同类别蛋白质

变异系数较高

变异系数较低

吸光稳定性

1 h内稳定

随时间变化

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产品货号:

AP12L025/AP12L026

产品规格:

500T/2500T

产品价格:

368/1398

产品描述

李记生物研制的BCA蛋白定量试剂盒可对蛋白质溶液进行高灵敏度比色定量,本试剂盒不受蛋白质种类的影响。BCA(bicinchoninic acid)是一种稳定的水溶性复合物,在碱性条件下,二价铜离子(Cu2+)可以被蛋白质还原成一价铜离子(Cu+),一价铜离子可以和BCA相互作用,两分子的BCA螯合一个一价铜离子,形成紫色的络合物,该复合物为水溶性,在562nm处显示强吸光性,在0.02~2 mg/mL浓度范围内蛋白质浓度与吸光度值成线性关系,因此可以根据待测蛋白在562 nm处的吸光度计算待测蛋白浓度。

由于还原剂和螯合剂对反应有阻碍,因此本制品不适用于含有还原剂(如:β-巯基乙醇,DTT等)或者螯合剂(如EDTA)的蛋白质样品的定量。对表面活性剂的干扰影响小。可用于含有表面活性剂蛋白质溶液的定量。

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价格

BCA蛋白定量试剂盒

AP12L025

500T

368

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AP12L026

2500T

1398

产品组分

产品

产品组

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AP12L025

BCA试剂 A

100 mL

BCA试剂 B

4 mL

蛋白标准(5 mg/mL BSA)

1 mL

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一份

AP12L026

BCA试剂 A

250 mL×2

BCA试剂 B

20 mL

蛋白标准(5 mg/mL BSA)

1 mL×5

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蓝冰运输。BCA试剂A和B室温保存,蛋白标准请-20℃保存,有效期12个月。

使用方法

  1. 完全融化蛋白标准品,取适量蛋白标准品稀释至终浓度为5mg/mL。蛋白样品使用什么溶液溶解,标准品也应用什么溶液稀释,但是为了简便起见,也可以用0.9% NaCl或PBS稀释标准品。将标准品按0、1、2、4、8、12、16、20 μL加到96孔板的标准品孔中,加标准品稀释液补足到20 μL,相当于标准品浓度分别为0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/mL。
  2. 根据样品数量,按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液,充分混匀。例如5mL BCA试剂A加100 μL BCA试剂B,混匀,配制成5.1ml BCA工作液。 BCA工作液室温24 h内稳定。
  3. 加适当体积样品到96孔板的样品孔中,也加稀释液到20μL。
  4. 各孔加入200μL BCA工作液,37℃放置20~30 min。也可以室温放置2 h,或60℃放置30 min。
  5. 测定A562吸光值,540~595nm之间的波长也可接受。根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。

注意事项

  1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
  2. 蛋白标准品配制后可立即使用,也可以-20℃长期保存。
  3. BCA法测定蛋白浓度时,颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高温度孵育或适当延长孵育时间以获得更好检测效果。
  4. 因为延长孵育时间会引起吸光值的变化,所以在用紫外分光光度计检测时,应尽可能加快检测速度,以免先检后检产生系统误差。
  5. 标准蛋白液的加量应当准确,如果加量不准确,会导致制作出来的标准曲线出现偏差,影响待测样品的浓度计算,所以一方面需要用梯度稀释的方法来配置标准蛋白液,另一方面应使用精确度高的移液枪。

 

Bradford法与BCA法的对比

方法

Bradford法

BCA法

灵敏度

1~5 μg

0.5~20 μg

时间

5~15 min

40~60 min

波长

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吸光稳定性

1 h内稳定

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