产品描述
本产品是由12条预染的线状双链DNA片段组成，保存于1×Loading Buffer中，可直接上样进行电泳，条带密集，需用高浓度胶低电压电泳，适用于较精确确认DNA片段大小。附带的5×Loading buffer用于检测样品时使用，在制作琼脂糖凝胶中不需要加任何染料，电泳后可直接在紫外灯下观察电泳条带。
1.5% Agarose, 5 μL/lane, 0.5×TBE buffer,7 v/cm,40 min
【注】：500 bp 为加亮带,浓度为其他条带的2.5倍；5 uL 产品中,每条带含量约 40 ng,加亮带约 100 ng。
产品组分
|
组分 |
50 T |
5*50 T |
|
EZ Mark预染DNA Ladder（100-1500bp） |
50 T |
5*50 T |
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5×Loading buffer |
1 mL |
1 mL |
运输与保存
蓝冰运输。4℃短期保存，有效期6个月；-20℃长期保存，有效期12个月。
本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。
GelRed 10,000 x in DMSO
无毒核酸染料, 核酸电泳
GelRed 核酸染料（10,000×in water）
无毒核酸染料, 核酸电泳
Q1：DNA条带不可见或很淡
A1：【原因①】：DNA Marker样品上样量不够。解决办法：按照说明书要求加样，或根据自己的实验调整加样量。 【原因②】：电泳时DNA跑出凝胶。解决办法：电泳时，将溴酚蓝跑到凝胶2/3处即可停止电泳。更小的DNA片段可能需要电泳的距离更短。 【原因③】：DNA条带被示踪染料遮盖。解决办法：选用不同示踪染料的电泳loading buffer，使待检测的DNA样品避开示踪染料的干扰，或适当降低loading buffer的用量。
Q2：DNA条带弥散或分离不开
A2：【原因①】：DNA有部分降解，核酸酶污染，保存不当。解决办法：每次吸取时更换灭菌枪头以免电泳缓冲液带入管中，用后于4℃保存，不可加热。 【原因②】：电泳时电压过低，使DNA条带发生扩散。解决办法：根据凝胶大小和电泳缓冲液类型，使用适当的电压进行电泳。 【原因③】：DNA上样量过大，条带变粗，条带间不易分离。解决办法：适当减少DNA上样量和加样体积。 【原因④】：琼脂糖凝胶浓度不合适。解决办法：参照各浓度的琼脂糖凝胶对应的有效分离范围重新制备凝胶。 【原因⑤】：凝胶质量较差，电泳缓冲液多次使用后失效。解决办法：换用高质量的琼脂糖制胶，更换缓冲液。 【原因⑥】：电泳后染色时间过长或拍照前放置过久。解决办法：电泳结束后及时观察拍照。
Q3：电泳时Marker前端条带容易变弱或丢失
A3：【原因①】：特指使用EB作为核酸染料时，由于EB与DNA的结合力比较弱，并且EB与DNA的电泳方向相反。当电泳时DNA条带跑到EB的前沿时，EB就会有很大一部分与DNA脱离，DNA条带将变弱。解决办法：电泳时，将溴酚蓝跑到凝胶2/3处即可停止电泳。Gelred核酸染料由于与DNA的结合非常牢固，不会出现电泳时间长DNA条带变弱的情况。
Q4：DNA条带异常
A4：【原因①】：不同样品的上样条件不同；上样量过大或过小。解决办法：选用相同的上样缓冲液，上样量尽可能接近；选择合适大小的上样孔，样品完全覆盖点样孔底部。 【原因②】：核酸样品纯度差，含有DNA结合蛋白或高浓度盐分。解决办法：酚/氯仿抽提或乙醇沉淀去除蛋白、盐分等杂质。 【原因③】：电泳缓冲液未完全浸没凝胶；凝胶中有气泡或污染物，点样孔质量差。解决办法：电泳缓冲液未完全浸没凝胶；凝胶中有气泡或污染物，点样孔质量差。 【原因④】：电压过高或电泳时间过长致使凝胶过热和DNA变性。解决办法：根据凝胶大小和电泳缓冲液类型，使用适当的电压进行电泳。
Q5：样品条带与DNA Marker条带大小不一致
A5：【原因①】：核酸降解或形成二聚体。解决办法：加热处理样品或重新制备。 【原因②】：相同分子量的DNA片段由于结构或序列的差异而有不同的迁移率。解决办法：判断DNA分子是否有特殊结构，如缺口、超螺旋、二聚体等；富含AT碱基的DNA迁移率比同分子量富含GC碱基的DNA片段慢。 【原因③】：梳子变形，点样孔不在同一水平线上。解决办法：制胶前检查梳子是否变形，使用完好的梳子制胶。 【原因④】：DNA的迁移不仅与实际大小有关，与是否结合有蛋白、离子状态、DNA的结构、凝胶等都有关。解决办法：如果使用SYBR Green I，GRred等核酸染料时，确定好核酸的电泳迁移率与DNA/染料的量的比例关系，当核酸染料量不足时，就会发生迁移率误差较大的情况。 【原因⑤】：样品中含有较高的盐离子浓度，引起较大的迁移误差。解决办法：对样品进行处理后上样电泳。 【原因⑥】：样品上样量与DNA marker条带的量相差较大或者体积相差较大时，会引起较大的迁移误差。解决办法：混和好Loading Buffer后的样品体积与DNA Marker的体积比较接近，这样更容易跑出理想的结果。
EZ Mark预染DNA Ladder（100-1500bp）
产品描述
本产品是由12条预染的线状双链DNA片段组成，保存于1×Loading Buffer中，可直接上样进行电泳，条带密集，需用高浓度胶低电压电泳，适用于较精确确认DNA片段大小。附带的5×Loading buffer用于检测样品时使用，在制作琼脂糖凝胶中不需要加任何染料，电泳后可直接在紫外灯下观察电泳条带。
1.5% Agarose, 5 μL/lane, 0.5×TBE buffer,7 v/cm,40 min
【注】：500 bp 为加亮带,浓度为其他条带的2.5倍；5 uL 产品中,每条带含量约 40 ng,加亮带约 100 ng。
产品组分
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组分 |
50 T |
5*50 T |
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EZ Mark预染DNA Ladder（100-1500bp） |
50 T |
5*50 T |
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5×Loading buffer |
1 mL |
1 mL |
运输与保存
蓝冰运输。4℃短期保存，有效期6个月；-20℃长期保存，有效期12个月。
本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。
Q1：DNA条带不可见或很淡
A1：【原因①】：DNA Marker样品上样量不够。解决办法：按照说明书要求加样，或根据自己的实验调整加样量。 【原因②】：电泳时DNA跑出凝胶。解决办法：电泳时，将溴酚蓝跑到凝胶2/3处即可停止电泳。更小的DNA片段可能需要电泳的距离更短。 【原因③】：DNA条带被示踪染料遮盖。解决办法：选用不同示踪染料的电泳loading buffer，使待检测的DNA样品避开示踪染料的干扰，或适当降低loading buffer的用量。
Q2：DNA条带弥散或分离不开
A2：【原因①】：DNA有部分降解，核酸酶污染，保存不当。解决办法：每次吸取时更换灭菌枪头以免电泳缓冲液带入管中，用后于4℃保存，不可加热。 【原因②】：电泳时电压过低，使DNA条带发生扩散。解决办法：根据凝胶大小和电泳缓冲液类型，使用适当的电压进行电泳。 【原因③】：DNA上样量过大，条带变粗，条带间不易分离。解决办法：适当减少DNA上样量和加样体积。 【原因④】：琼脂糖凝胶浓度不合适。解决办法：参照各浓度的琼脂糖凝胶对应的有效分离范围重新制备凝胶。 【原因⑤】：凝胶质量较差，电泳缓冲液多次使用后失效。解决办法：换用高质量的琼脂糖制胶，更换缓冲液。 【原因⑥】：电泳后染色时间过长或拍照前放置过久。解决办法：电泳结束后及时观察拍照。
Q3：电泳时Marker前端条带容易变弱或丢失
A3：【原因①】：特指使用EB作为核酸染料时，由于EB与DNA的结合力比较弱，并且EB与DNA的电泳方向相反。当电泳时DNA条带跑到EB的前沿时，EB就会有很大一部分与DNA脱离，DNA条带将变弱。解决办法：电泳时，将溴酚蓝跑到凝胶2/3处即可停止电泳。Gelred核酸染料由于与DNA的结合非常牢固，不会出现电泳时间长DNA条带变弱的情况。
Q4：DNA条带异常
A4：【原因①】：不同样品的上样条件不同；上样量过大或过小。解决办法：选用相同的上样缓冲液，上样量尽可能接近；选择合适大小的上样孔，样品完全覆盖点样孔底部。 【原因②】：核酸样品纯度差，含有DNA结合蛋白或高浓度盐分。解决办法：酚/氯仿抽提或乙醇沉淀去除蛋白、盐分等杂质。 【原因③】：电泳缓冲液未完全浸没凝胶；凝胶中有气泡或污染物，点样孔质量差。解决办法：电泳缓冲液未完全浸没凝胶；凝胶中有气泡或污染物，点样孔质量差。 【原因④】：电压过高或电泳时间过长致使凝胶过热和DNA变性。解决办法：根据凝胶大小和电泳缓冲液类型，使用适当的电压进行电泳。
Q5：样品条带与DNA Marker条带大小不一致
A5：【原因①】：核酸降解或形成二聚体。解决办法：加热处理样品或重新制备。 【原因②】：相同分子量的DNA片段由于结构或序列的差异而有不同的迁移率。解决办法：判断DNA分子是否有特殊结构，如缺口、超螺旋、二聚体等；富含AT碱基的DNA迁移率比同分子量富含GC碱基的DNA片段慢。 【原因③】：梳子变形，点样孔不在同一水平线上。解决办法：制胶前检查梳子是否变形，使用完好的梳子制胶。 【原因④】：DNA的迁移不仅与实际大小有关，与是否结合有蛋白、离子状态、DNA的结构、凝胶等都有关。解决办法：如果使用SYBR Green I，GRred等核酸染料时，确定好核酸的电泳迁移率与DNA/染料的量的比例关系，当核酸染料量不足时，就会发生迁移率误差较大的情况。 【原因⑤】：样品中含有较高的盐离子浓度，引起较大的迁移误差。解决办法：对样品进行处理后上样电泳。 【原因⑥】：样品上样量与DNA marker条带的量相差较大或者体积相差较大时，会引起较大的迁移误差。解决办法：混和好Loading Buffer后的样品体积与DNA Marker的体积比较接近，这样更容易跑出理想的结果。