PikoOrange蛋白定量试剂盒

产品货号:

AP12L034

产品规格:

100assays

产品价格:

180

产品描述

PikoOrange Protein Quantitation Kit是一个高度敏感的基于荧光技术定量纯化蛋白质的试剂盒,其检测蛋白浓度范围为0.1~10 μg/ml。比起传统定量方法如BCA、Bradford或Lowry蛋白定量分析,PikoOrange蛋白定量试剂盒敏感性更佳,此外,与NanoOrange蛋白质定量测定技术相比具有更加优秀的线性和重现性。PikoOrange蛋白定量试剂盒可显示不同蛋白质之间的最小变异性,且荧光信号稳定长达16 h;其受测样本不论为纯化蛋白或抗体皆适用。需特别注意的是,PikoOrange对盐类、缓冲液、去垢剂或是其他化学物质都有不同程度的耐受性(表1)。

产品信息

产品名称

货号

规格

价格

PikoOrange 蛋白定量试剂盒

AP12L034

100 assays

180

PikoOrange 蛋白定量试剂盒

AP12L036

1000 assays

1500

产品组分

组分

AP12L034

AP12L036

A: PikoOrange buffer, 10X (contains 2mM sodium azide)

2.5 mL

25mL

B: PikoOrange dye, 500X in DMSO

125 μL

1.25 mL

C: Bovine serum albumin (BSA) standard, 2mg/mL (contains 2 mM sodium azide)

40 μL

0.4 mL

运输与保存

常温运输。组分A常温保存;组分B常温避光保存;组分C  4℃ 保存。有效期36个月。

【注】:如果缓冲液出现沉淀,可加热到37℃并漩涡溶解。

使用方法

  1. 制备1x PikoOrange缓冲液: 1:10 稀释10x缓冲液在dH2O。例如,添加1 mL10x 缓冲液至9 mL dH2O。PikoOrange缓冲液可以储存在室温下。
  2. 使用前准备PikoOrange工作液:将200xPikoOrange染料按1:200用1x PikoOrange缓冲液稀释。例如,添加25μL 500x PikoOrange染料至5 mL 1x PikoOrange缓冲液。【注】:您将需要大约3 mL工作液制作标准曲线(见表2)以及每孔检测样品250 μL工作液。
  3. 准备未知样本:10 μL样本添加 250 μL PikoOrange工作液。【注】:您可能需要稀释未知样本以得到不同浓度的样本。样品稀释可能会减少干扰物质的影响。
  4. 准备一个蛋白质标准曲线所需的BSA浓度,如表2所示。
  5. 样本和标准蛋白加热至90~95℃ 10 min,此过程需避光操作。
  6. 取出样本室温避光放置20min冷却。短时间离心收集全部样本。
  7. 每个标准样品或未知样品取200 μL转移到96孔酶标板,荧光酶标仪读数。激发/发射波长为480/598 nm。【注】:样品可以被转移到荧光试管使用荧光仪测量。如果需要超过200 μL体积测量,等比例放大配置方案。

1:PikoOrange对不同化学物质的耐受性

化合物

最高承受浓度

SDS

0.01%

Triton X-100

Below 0.001%

Tween 20

Below 0.001%

CHAPS

Below 0.001%

Sodium deoxycholate (DOC)

Below 0.001%

Urea

10 mM

DTT

100 mM

beta-ME

0.1%

Ammonium sulfate

1 mM

Sodium azide

2 mM

Imidazole

50 mM

DNA

10ug/mL

EDTA

1mM

Sucrose

10 mM (0.34%)

Glycerol

1%

PBS

0.02X

NaCl

1 mM

CaCl2

0.01 mM

MgCl2

0.2 mM

 2准备BSA样品制作标准曲线

 

BSA体积

工作液体积

BSA 终浓度(μg/mL)

A

5 μL BSA std (2 mg/mL)

995 μL

10

B

250 μL solution A

250 μL

5

C

250 μL solution B

250 μL

2.5

D

200 μL solution C

300 μL

1

E

250 μL solution D

250 μL

0.5

F

250 μL solution E

250 μL

0.25

G

100 μL solution F

150 μL

0.1

H

0 μL solution G

250 μL

0

注意事项

  1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

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产品描述

PikoOrange Protein Quantitation Kit是一个高度敏感的基于荧光技术定量纯化蛋白质的试剂盒,其检测蛋白浓度范围为0.1~10 μg/ml。比起传统定量方法如BCA、Bradford或Lowry蛋白定量分析,PikoOrange蛋白定量试剂盒敏感性更佳,此外,与NanoOrange蛋白质定量测定技术相比具有更加优秀的线性和重现性。PikoOrange蛋白定量试剂盒可显示不同蛋白质之间的最小变异性,且荧光信号稳定长达16 h;其受测样本不论为纯化蛋白或抗体皆适用。需特别注意的是,PikoOrange对盐类、缓冲液、去垢剂或是其他化学物质都有不同程度的耐受性(表1)。

产品信息

产品名称

货号

规格

价格

PikoOrange 蛋白定量试剂盒

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100 assays

180

PikoOrange 蛋白定量试剂盒

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1000 assays

1500

产品组分

组分

AP12L034

AP12L036

A: PikoOrange buffer, 10X (contains 2mM sodium azide)

2.5 mL

25mL

B: PikoOrange dye, 500X in DMSO

125 μL

1.25 mL

C: Bovine serum albumin (BSA) standard, 2mg/mL (contains 2 mM sodium azide)

40 μL

0.4 mL

运输与保存

常温运输。组分A常温保存;组分B常温避光保存;组分C  4℃ 保存。有效期36个月。

【注】:如果缓冲液出现沉淀,可加热到37℃并漩涡溶解。

使用方法

  1. 制备1x PikoOrange缓冲液: 1:10 稀释10x缓冲液在dH2O。例如,添加1 mL10x 缓冲液至9 mL dH2O。PikoOrange缓冲液可以储存在室温下。
  2. 使用前准备PikoOrange工作液:将200xPikoOrange染料按1:200用1x PikoOrange缓冲液稀释。例如,添加25μL 500x PikoOrange染料至5 mL 1x PikoOrange缓冲液。【注】:您将需要大约3 mL工作液制作标准曲线(见表2)以及每孔检测样品250 μL工作液。
  3. 准备未知样本:10 μL样本添加 250 μL PikoOrange工作液。【注】:您可能需要稀释未知样本以得到不同浓度的样本。样品稀释可能会减少干扰物质的影响。
  4. 准备一个蛋白质标准曲线所需的BSA浓度,如表2所示。
  5. 样本和标准蛋白加热至90~95℃ 10 min,此过程需避光操作。
  6. 取出样本室温避光放置20min冷却。短时间离心收集全部样本。
  7. 每个标准样品或未知样品取200 μL转移到96孔酶标板,荧光酶标仪读数。激发/发射波长为480/598 nm。【注】:样品可以被转移到荧光试管使用荧光仪测量。如果需要超过200 μL体积测量,等比例放大配置方案。

1:PikoOrange对不同化学物质的耐受性

化合物

最高承受浓度

SDS

0.01%

Triton X-100

Below 0.001%

Tween 20

Below 0.001%

CHAPS

Below 0.001%

Sodium deoxycholate (DOC)

Below 0.001%

Urea

10 mM

DTT

100 mM

beta-ME

0.1%

Ammonium sulfate

1 mM

Sodium azide

2 mM

Imidazole

50 mM

DNA

10ug/mL

EDTA

1mM

Sucrose

10 mM (0.34%)

Glycerol

1%

PBS

0.02X

NaCl

1 mM

CaCl2

0.01 mM

MgCl2

0.2 mM

 2准备BSA样品制作标准曲线

 

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A

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995 μL

10

B

250 μL solution A

250 μL

5

C

250 μL solution B

250 μL

2.5

D

200 μL solution C

300 μL

1

E

250 μL solution D

250 μL

0.5

F

250 μL solution E

250 μL

0.25

G

100 μL solution F

150 μL

0.1

H

0 μL solution G

250 μL

0

注意事项

  1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

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