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Quick Cell 发光法支原体检测试剂盒

产品货号:

AC16L062

产品规格:

50T

产品价格:

1880

产品描述

Quick Cell发光法支原体检测试剂盒,通过检测支原体的特异性酶活性以达到检测体外培养的哺乳动物细胞是否被支原体污染的目的。

在支原体裂解后,该支原体特异性的酶,在底物存在下,具有将ADP转化成ATP的功能。由于荧光素酶(Luciferase)催化底物荧光素(Luciferin)产生光的反应需要ATP的参与,支原体特异性酶催化产生的ATP含量,可以通过该反应转化成生物发光(Bioluminescence)信号,该信号可以使用专门的发光检测仪(Luminometer)或具有发光检测功能的多功能酶标仪进行检测,发光的强度与ATP的含量成正比。通过比较细胞培养上清和未用于细胞培养的培养液上清二者的支原体特异性酶的含量,即可知道培养的细胞是否被支原体污染。反应原理如下:

产品组分

产品组分

规格

支原体检测溶液

5.5 mL

试剂 A(已冻干)

2.5 mL(50次检测)

试剂 B(已冻干)

2.5 mL(50次检测)

【注】:本试剂盒不含阳性对照。

 

运输与保存

干冰运输。-20℃短期保存,-80℃长期保存;有效期60个月。

 

本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

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Q1:发光法发支原体检测如何避免假阴性或假阳性?

A1:发光法支原体检测原理是测定支原体酶活性,特意性酶活性不存在污染问题,避免了假阳性出现,反应体系里酶活性也不会被抑制,所以也不会出现假阴性。

Q2:PCR法支原体检测试剂盒,怎么提高检测灵敏度?

A2:(1) 可以通过对样品进行支原体基因组DNA的提取,从而提高《PCR法支原体检测试剂盒体》的相对最高检测灵敏度(相对提高)。该方法可以提高10-100倍的相对检测灵敏度。 (2) 对支原体进行离心浓缩:取1 mL细胞上清,先13000 rpm(约16000 g)离心5 minutes,吸走全部上清,用50 μL 5 mM Tris-HCl, pH 8.5 重悬沉淀,95 ℃加热处理5minutes,简单离心后(1000 g,5 seconds),取上清进行检测。该离心浓缩过程大约可以将相对检测灵敏度提高20倍。 (3) 如果样品是经过支原体基因组DNA提取纯化或者离心清洗的,还可以通过提高每个反应管的DNA加入量(比如从2 μL提高到20 μL),该方法可提高10倍的相对检测灵敏度。

Q3:李记生物4款检测试剂盒,检测灵敏度比较如何?

A3:1、“探针法”的检测灵敏度最高,其检测下限可以达到5.6-10.8 copies/2μL;2、其次是“PCR法”,与“探针法”的最高检测灵敏度基本持平或略低一点;3、“快速法”的检测灵敏度比“PCR法”和“探针法”都要低,其检测下限大约为22.5-172.3 copies/2μL;4、“发光法”的检测灵敏度最低,其检测下限大约为2200个活菌/μL【10^(-3)稀释度】。

Quick Cell 发光法支原体检测试剂盒

产品描述

Quick Cell发光法支原体检测试剂盒,通过检测支原体的特异性酶活性以达到检测体外培养的哺乳动物细胞是否被支原体污染的目的。

在支原体裂解后,该支原体特异性的酶,在底物存在下,具有将ADP转化成ATP的功能。由于荧光素酶(Luciferase)催化底物荧光素(Luciferin)产生光的反应需要ATP的参与,支原体特异性酶催化产生的ATP含量,可以通过该反应转化成生物发光(Bioluminescence)信号,该信号可以使用专门的发光检测仪(Luminometer)或具有发光检测功能的多功能酶标仪进行检测,发光的强度与ATP的含量成正比。通过比较细胞培养上清和未用于细胞培养的培养液上清二者的支原体特异性酶的含量,即可知道培养的细胞是否被支原体污染。反应原理如下:

产品组分

产品组分

规格

支原体检测溶液

5.5 mL

试剂 A(已冻干)

2.5 mL(50次检测)

试剂 B(已冻干)

2.5 mL(50次检测)

【注】:本试剂盒不含阳性对照。

 

运输与保存

干冰运输。-20℃短期保存,-80℃长期保存;有效期60个月。

 

本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

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A2:(1) 可以通过对样品进行支原体基因组DNA的提取,从而提高《PCR法支原体检测试剂盒体》的相对最高检测灵敏度(相对提高)。该方法可以提高10-100倍的相对检测灵敏度。 (2) 对支原体进行离心浓缩:取1 mL细胞上清,先13000 rpm(约16000 g)离心5 minutes,吸走全部上清,用50 μL 5 mM Tris-HCl, pH 8.5 重悬沉淀,95 ℃加热处理5minutes,简单离心后(1000 g,5 seconds),取上清进行检测。该离心浓缩过程大约可以将相对检测灵敏度提高20倍。 (3) 如果样品是经过支原体基因组DNA提取纯化或者离心清洗的,还可以通过提高每个反应管的DNA加入量(比如从2 μL提高到20 μL),该方法可提高10倍的相对检测灵敏度。

Q3:李记生物4款检测试剂盒,检测灵敏度比较如何?

A3:1、“探针法”的检测灵敏度最高,其检测下限可以达到5.6-10.8 copies/2μL;2、其次是“PCR法”,与“探针法”的最高检测灵敏度基本持平或略低一点;3、“快速法”的检测灵敏度比“PCR法”和“探针法”都要低,其检测下限大约为22.5-172.3 copies/2μL;4、“发光法”的检测灵敏度最低,其检测下限大约为2200个活菌/μL【10^(-3)稀释度】。