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Quick Cell PCR法支原体检测试剂盒

产品货号:

AC16L064

产品规格:

100T

产品价格:

1650

产品描述

Quick Cell PCR法支原体检测试剂盒,本试剂盒采用一对支原体特异性引物,用于对样品的支原体基因组DNA进行PCR扩增,然后通过琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行检测。试剂盒内同时含有内参对照,用于监控PCR是否正常扩增。

本试剂盒是一种广谱的支原体检测试剂盒,可以识别所有100多种至今已发现的支原体;能用于检测一切可能含支原体的样品,比如:体外细胞培养的上清;血清;各种体液,如唾液、尿液、鼻腔分泌物等;其他液体样品等。具有100%支原体识别率、灵敏度极高、含内参条带从而可以区分真阴性样品和假阴性样品、无需配套相对昂贵的荧光定量PCR仪等优点。

经多次测试,本试剂盒有记录可以识别在体外细胞培养中曾经报道出现的20种支原体,根据文献报道,这些支原体基本能占污染细胞的支原体种类的100%。具体如下:(1)M. hyorhinis、(2)M. fermentans、(3)M. arginini、(4)M. hominis、(5)M. orale、(6)M. salivarium、(7)M.pirum、(8)A. laidlawii、(9)M. agalactiae、(10)M. bovis、(11)M. bovoculi、(12)A. axanthum、(13)M. buccale、(14)M. pneumoniae、(15)M. arthritidis、(16)M. pulmonis、(17)M. gallisepticum、(18)M. gallinarum、(19)M. canis、(20)Ureaplasma urealyticum(注:M.为Mycoplasma的缩写; A.为Acholeplasma的缩写)。

产品组分

产品组分

规格

支原体引物和内参(100次)

206 μL

阳性支原体DNA

50 μL

去离子水

1.8 mL

(请使用普通蒸馏水或去离子水,不能使用去内毒素的水)

【注】:以下试剂需要自行准备:①普通的Taq DNA 聚合酶(推荐使用 Takara 品牌的Ex Taq Hot Start version,货号:RR006A,已包含2.5 mM 的 dNTP)和相应的缓冲液;② 2.5 mM的dNTP;③DNA上样缓冲液(推荐使用李记生物的GelRed预染DNA上样缓冲液(5X),货号:AN34L047,该缓冲液已含无毒核酸染料,不需要接触 EB 等致癌物质)。

 

运输与保存

蓝冰运输。-20℃保存,有效期60个月。

 

本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

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Q1:PCR法支原体检测试剂盒,怎么提高检测灵敏度?

A1:(1) 可以通过对样品进行支原体基因组DNA的提取,从而提高《PCR法支原体检测试剂盒体》的相对最高检测灵敏度(相对提高)。该方法可以提高10-100倍的相对检测灵敏度。 (2) 对支原体进行离心浓缩:取1 mL细胞上清,先13000 rpm(约16000 g)离心5 minutes,吸走全部上清,用50 μL 5 mM Tris-HCl, pH 8.5 重悬沉淀,95 ℃加热处理5minutes,简单离心后(1000 g,5 seconds),取上清进行检测。该离心浓缩过程大约可以将相对检测灵敏度提高20倍。 (3) 如果样品是经过支原体基因组DNA提取纯化或者离心清洗的,还可以通过提高每个反应管的DNA加入量(比如从2 μL提高到20 μL),该方法可提高10倍的相对检测灵敏度。

Q2:李记生物4款检测试剂盒,检测灵敏度比较如何?

A2:1、“探针法”的检测灵敏度最高,其检测下限可以达到5.6-10.8 copies/2μL;2、其次是“PCR法”,与“探针法”的最高检测灵敏度基本持平或略低一点;3、“快速法”的检测灵敏度比“PCR法”和“探针法”都要低,其检测下限大约为22.5-172.3 copies/2μL;4、“发光法”的检测灵敏度最低,其检测下限大约为2200个活菌/μL【10^(-3)稀释度】。

Quick Cell PCR法支原体检测试剂盒

产品描述

Quick Cell PCR法支原体检测试剂盒,本试剂盒采用一对支原体特异性引物,用于对样品的支原体基因组DNA进行PCR扩增,然后通过琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行检测。试剂盒内同时含有内参对照,用于监控PCR是否正常扩增。

本试剂盒是一种广谱的支原体检测试剂盒,可以识别所有100多种至今已发现的支原体;能用于检测一切可能含支原体的样品,比如:体外细胞培养的上清;血清;各种体液,如唾液、尿液、鼻腔分泌物等;其他液体样品等。具有100%支原体识别率、灵敏度极高、含内参条带从而可以区分真阴性样品和假阴性样品、无需配套相对昂贵的荧光定量PCR仪等优点。

经多次测试,本试剂盒有记录可以识别在体外细胞培养中曾经报道出现的20种支原体,根据文献报道,这些支原体基本能占污染细胞的支原体种类的100%。具体如下:(1)M. hyorhinis、(2)M. fermentans、(3)M. arginini、(4)M. hominis、(5)M. orale、(6)M. salivarium、(7)M.pirum、(8)A. laidlawii、(9)M. agalactiae、(10)M. bovis、(11)M. bovoculi、(12)A. axanthum、(13)M. buccale、(14)M. pneumoniae、(15)M. arthritidis、(16)M. pulmonis、(17)M. gallisepticum、(18)M. gallinarum、(19)M. canis、(20)Ureaplasma urealyticum(注:M.为Mycoplasma的缩写; A.为Acholeplasma的缩写)。

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支原体引物和内参(100次)

206 μL

阳性支原体DNA

50 μL

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1.8 mL

(请使用普通蒸馏水或去离子水,不能使用去内毒素的水)

【注】:以下试剂需要自行准备:①普通的Taq DNA 聚合酶(推荐使用 Takara 品牌的Ex Taq Hot Start version,货号:RR006A,已包含2.5 mM 的 dNTP)和相应的缓冲液;② 2.5 mM的dNTP;③DNA上样缓冲液(推荐使用李记生物的GelRed预染DNA上样缓冲液(5X),货号:AN34L047,该缓冲液已含无毒核酸染料,不需要接触 EB 等致癌物质)。

 

运输与保存

蓝冰运输。-20℃保存,有效期60个月。

 

本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

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A1:(1) 可以通过对样品进行支原体基因组DNA的提取,从而提高《PCR法支原体检测试剂盒体》的相对最高检测灵敏度(相对提高)。该方法可以提高10-100倍的相对检测灵敏度。 (2) 对支原体进行离心浓缩:取1 mL细胞上清,先13000 rpm(约16000 g)离心5 minutes,吸走全部上清,用50 μL 5 mM Tris-HCl, pH 8.5 重悬沉淀,95 ℃加热处理5minutes,简单离心后(1000 g,5 seconds),取上清进行检测。该离心浓缩过程大约可以将相对检测灵敏度提高20倍。 (3) 如果样品是经过支原体基因组DNA提取纯化或者离心清洗的,还可以通过提高每个反应管的DNA加入量(比如从2 μL提高到20 μL),该方法可提高10倍的相对检测灵敏度。

Q2:李记生物4款检测试剂盒,检测灵敏度比较如何?

A2:1、“探针法”的检测灵敏度最高,其检测下限可以达到5.6-10.8 copies/2μL;2、其次是“PCR法”,与“探针法”的最高检测灵敏度基本持平或略低一点;3、“快速法”的检测灵敏度比“PCR法”和“探针法”都要低,其检测下限大约为22.5-172.3 copies/2μL;4、“发光法”的检测灵敏度最低,其检测下限大约为2200个活菌/μL【10^(-3)稀释度】。