Recombinant Enterokinase重组肠激酶

产品货号:

AP43L014/AP43L015

产品规格:

500U/1000U

产品价格:

1050/1800

产品描述

肠激酶(Enterokinase)是一种蛋白酶,高度专一性识别天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-赖氨酸(Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,DDDDK)序列,切割赖氨酸羧基端肽键,去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签,释放出目的蛋白。重组肠激酶(Recombinant Enterokinase,rEK)是高纯度纯化的牛肠激酶轻链亚基,它与天然提取的肠激酶具有同样特异的切割酶活性,且切割速率更快。

李记生物研发的重组肠激酶,采用重组酵母分泌表达,纯度高、活性高,可以在较宽pH范围(pH4.5~9.5)和温度范围(4~45℃)有效切割,不含其它蛋白酶,并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。

重组肠激酶(rEK)被广泛地应用于基因工程产品的开发,例如,作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性切割,尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。产品特性见表1。

订购信息

产品名称

货号

规格

价格

Recombinant Enterokinase重组肠激酶

AP43L014

500 U

1050

Recombinant Enterokinase重组肠激酶

AP43L015

1000 U

1800

Recombinant Enterokinase重组肠激酶

AP43L016

5000 U

6800

Recombinant Enterokinase重组肠激酶

AP43L017

10 x 5000 U

45000

运输与保存

蓝冰运输。-20℃保存,有效期12个月。

使用方法(参考举例)

1.反应体系构建,以1000μL为例,反应体系如下:

融合蛋白

0.5~1 mg(蛋白浓度:0.1~1 mg·mL-1 )

Recombinant Enterokinase重组肠激酶

0.5~2.5 uL(相当于2~10U)

10 x rEK反应缓冲液

100 μL

超纯水

根据需要补充体积到1000 μL

【注】:10× rEK反应缓冲液配方:0.5 M Tris-HCl,pH 8.0(22℃),10 mM CaCl2,1% Tween-20。

2.25 ℃过夜酶切,可用SDS-PAGE检测酶切效果。

3.(可选)本品具有高活力的重组肠激酶,切割蛋白使用量少,可不考虑去除。后续如需去除重组肠激酶,可用阴离子交换树脂(eg.DEAE-FF)对其进行洗脱。推荐洗脱条件如下:平衡缓冲液:25 mM Tris-HCl,pH8.0;洗脱缓冲液:25 mM Tris-HCl ,pH8.0,含100 mM NaCl。

注意事项

  1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
  2. 样品溶液含有在>2mM 尿素,或>250 mM NaCl,或>20 mM β-ME,或>0.1% SDS,或>50 mM咪唑条件下,为获得理想的酶切结果,请先将样品透析到1×反应缓冲液中,然后再进行酶切实验。
  3. 磷酸盐对Enterokinase有很强的抑制作用,少量的磷酸盐都会严重影响Enterokinase的活性,因此在酶切体系内不能存在磷酸盐。

来源(Source)

重组酵母

分子量(Molecular Weight)

理论值25.850 kDa

外观(Appearance)

透明液体

酶浓度(Enzyme Concentration)

4 U/uL

活性定义(Activity Definition)

在37℃,16小时内将0.5 mg的Thioredoxin-NP-27 95%降解为NP-27所需要的酶量定义为1个活性单位(1U) 。

内毒素检测(Endotoxin)

用LAL法测定内毒素含量小于1 EU·μg-1

质量保证(Quality assurance)

经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;本制品中不含有非特异性的蛋白酶切活性。

1:产品特性

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产品规格:

500U/1000U

产品价格:

1050/1800

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肠激酶(Enterokinase)是一种蛋白酶,高度专一性识别天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-赖氨酸(Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,DDDDK)序列,切割赖氨酸羧基端肽键,去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签,释放出目的蛋白。重组肠激酶(Recombinant Enterokinase,rEK)是高纯度纯化的牛肠激酶轻链亚基,它与天然提取的肠激酶具有同样特异的切割酶活性,且切割速率更快。

李记生物研发的重组肠激酶,采用重组酵母分泌表达,纯度高、活性高,可以在较宽pH范围(pH4.5~9.5)和温度范围(4~45℃)有效切割,不含其它蛋白酶,并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。

重组肠激酶(rEK)被广泛地应用于基因工程产品的开发,例如,作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性切割,尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。产品特性见表1。

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货号

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Recombinant Enterokinase重组肠激酶

AP43L014

500 U

1050

Recombinant Enterokinase重组肠激酶

AP43L015

1000 U

1800

Recombinant Enterokinase重组肠激酶

AP43L016

5000 U

6800

Recombinant Enterokinase重组肠激酶

AP43L017

10 x 5000 U

45000

运输与保存

蓝冰运输。-20℃保存,有效期12个月。

使用方法(参考举例)

1.反应体系构建,以1000μL为例,反应体系如下:

融合蛋白

0.5~1 mg(蛋白浓度:0.1~1 mg·mL-1 )

Recombinant Enterokinase重组肠激酶

0.5~2.5 uL(相当于2~10U)

10 x rEK反应缓冲液

100 μL

超纯水

根据需要补充体积到1000 μL

【注】:10× rEK反应缓冲液配方:0.5 M Tris-HCl,pH 8.0(22℃),10 mM CaCl2,1% Tween-20。

2.25 ℃过夜酶切,可用SDS-PAGE检测酶切效果。

3.(可选)本品具有高活力的重组肠激酶,切割蛋白使用量少,可不考虑去除。后续如需去除重组肠激酶,可用阴离子交换树脂(eg.DEAE-FF)对其进行洗脱。推荐洗脱条件如下:平衡缓冲液:25 mM Tris-HCl,pH8.0;洗脱缓冲液:25 mM Tris-HCl ,pH8.0,含100 mM NaCl。

注意事项

  1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
  2. 样品溶液含有在>2mM 尿素,或>250 mM NaCl,或>20 mM β-ME,或>0.1% SDS,或>50 mM咪唑条件下,为获得理想的酶切结果,请先将样品透析到1×反应缓冲液中,然后再进行酶切实验。
  3. 磷酸盐对Enterokinase有很强的抑制作用,少量的磷酸盐都会严重影响Enterokinase的活性,因此在酶切体系内不能存在磷酸盐。

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内毒素检测(Endotoxin)

用LAL法测定内毒素含量小于1 EU·μg-1

质量保证(Quality assurance)

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