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活性检测CCK-8细胞增殖与毒性检测试剂盒

产品货号:

AC11L054

产品规格:

500T/10000T

产品价格:

480/1800

产品描述

活性检测CCK-8细胞增殖与毒性检测试剂盒,是一种基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度的比色检测试剂盒。检测原理为:WST-8在电子耦合剂1-Methoxy PMS存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性的甲臜(formazan,参考图1),生成的甲臜的颜色深浅与细胞增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450nm 波长处测定OD 值,间接反映活细胞数量。

本试剂盒可用于细胞增殖测定,细胞毒性的检测,药物筛选,以及细胞生长抑制检测等。

图1:WST-8分子结构及检测原理

产品优势

  1. 安全低毒:使用后对细胞无损伤,不改变细胞形态,可进行连续观察;
  2. 稳定性好:李记生物CCK-8为白瓶包装、质量稳定,-20℃可保存两年;
  3. 灵敏度高:较MTT法灵敏度提高1000倍,重复性好;
  4. 操作便捷:即开即用,只需一步即可检测结果;
  5. 反应快:半小时即可检测;
  6. 经济实惠:20*500T仅需1800元。
  7. 案列可于官网-资源支持查询!

CCK-8活力测定公式

活力计算:细胞活力×(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)] ×100
A(加药):具有细胞、CCK-8溶液和药物溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培养基和CCK-8溶液而没有细胞的孔的吸光度
A(0加药):具有细胞、CCK-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度

产品组分

组分

500T( 5 mL)

20*500T(5mL)

活性检测CCK-8细胞增殖与毒性检测试剂盒

500T( 5 mL)

20*500T(5mL)

 

 

运输与保存

蓝冰运输。-20℃保存,有效期24个月。【注】:反复冻融会造成测定背景OD值升高。

本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

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Q1:李记CCK-8的保存和稳定性如何?常温放置了几天还能用吗?

A1:李记CCK-8稳定性非常高,避光条件-20℃有效期2年,4℃有效期半年。保存过程中尽可能避免反复冻融和样品污染。

Q2:一般CCK-8加入剂量是多少?

A2:一般建议按培养体系的10%添加,添加时要避免产生气泡。

Q3:怎么避免添加CCK-8过程中产生气泡?

A3:建议采用多通道移液器斜贴着培养板壁加样,减少平行孔间的误差,不要插到培养基液面下加样,容易产生气泡,干扰OD值。

Q4:CCK-8的细胞毒性如何?

A4:CCK-8毒性非常低,因此 CCK-8检测完后相同的细胞还能用于其它细胞增殖检测如结晶紫染色法,中性红染色法或DNA荧光染色法等。

Q5:CCK-8会对活细胞进行染色吗?

A5:不会进入细胞染色,整个显色反应都是在培养体系中进行的。另外,WST和WST-8甲臜都属于高度水溶性组分,反应结束更换新的培养液,即可清除外源组分。

Q6:做细胞活性检测时,每孔应该接种多少个细胞?

A6:当使用标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1000个/孔(100 μL培养基);检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2500个/孔(100 μL培养基)。

Q7:培养基的本底颜色如酚红会不会影响细胞活性的检测呢?

A7:不会的,培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。

Q8:能否用384孔板进行细胞增殖与活性检测的实验呢?

A8:可以,CCK-8产品的使用量为每孔培养基总体积的10%。建议先将CCK-8产品稀释一倍,然后加入培养基总体积的20%即可,这样可减少误差。

Q9:CCK只可以在450 nm波长处测OD值吗?

A9:可以在450 nm波长处测OD值,但是若无此波长的滤光片,可选择吸光度在430-490 nm之间的滤光片,但是450nm滤光片的检测灵敏度最高。

Q10:若是暂时不检测OD值,该如何处理?

A10:若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1 M的HCL 溶液或者1% w/v SDS 溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。

Q11:在加入CCK-8时,可否不更换培养基?

A11:一般情况下可以不更换培养基。但是如果培养基里有氧化还原性物质的话,有可能会产生误差,则必须更换培养基。

Q12:如果OD值太高,怎么解决?

A12:①适当减少细胞数量;②适当缩短加入CCK-8后的培养时间。

Q13:如果OD值太低,怎么解决?

A13:①适当增加细胞数量;②延长加入CCK-8后的反应时间。

Q14:使用CCK-8后发现OD值比较低,这是什么情况?

A14:数值跟培养基还有细胞类别有关系的,有些细胞本身分裂偏慢,那么OD偏低是正常的;只要在0-1之间,且产生了较好的线性,能判断药物对细胞的影响就好。如果觉得没有到达好的效果,那么可以通过延长时间来获得更好一点的结果。

活性检测CCK-8细胞增殖与毒性检测试剂盒

产品描述

活性检测CCK-8细胞增殖与毒性检测试剂盒,是一种基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度的比色检测试剂盒。检测原理为:WST-8在电子耦合剂1-Methoxy PMS存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性的甲臜(formazan,参考图1),生成的甲臜的颜色深浅与细胞增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450nm 波长处测定OD 值,间接反映活细胞数量。

本试剂盒可用于细胞增殖测定,细胞毒性的检测,药物筛选,以及细胞生长抑制检测等。

图1:WST-8分子结构及检测原理

产品优势

  1. 安全低毒:使用后对细胞无损伤,不改变细胞形态,可进行连续观察;
  2. 稳定性好:李记生物CCK-8为白瓶包装、质量稳定,-20℃可保存两年;
  3. 灵敏度高:较MTT法灵敏度提高1000倍,重复性好;
  4. 操作便捷:即开即用,只需一步即可检测结果;
  5. 反应快:半小时即可检测;
  6. 经济实惠:20*500T仅需1800元。
  7. 案列可于官网-资源支持查询!

CCK-8活力测定公式

活力计算:细胞活力×(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)] ×100
A(加药):具有细胞、CCK-8溶液和药物溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培养基和CCK-8溶液而没有细胞的孔的吸光度
A(0加药):具有细胞、CCK-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度

产品组分

组分

500T( 5 mL)

20*500T(5mL)

活性检测CCK-8细胞增殖与毒性检测试剂盒

500T( 5 mL)

20*500T(5mL)

 

 

运输与保存

蓝冰运输。-20℃保存,有效期24个月。【注】:反复冻融会造成测定背景OD值升高。

本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

Q1:李记CCK-8的保存和稳定性如何?常温放置了几天还能用吗?

A1:李记CCK-8稳定性非常高,避光条件-20℃有效期2年,4℃有效期半年。保存过程中尽可能避免反复冻融和样品污染。

Q2:一般CCK-8加入剂量是多少?

A2:一般建议按培养体系的10%添加,添加时要避免产生气泡。

Q3:怎么避免添加CCK-8过程中产生气泡?

A3:建议采用多通道移液器斜贴着培养板壁加样,减少平行孔间的误差,不要插到培养基液面下加样,容易产生气泡,干扰OD值。

Q4:CCK-8的细胞毒性如何?

A4:CCK-8毒性非常低,因此 CCK-8检测完后相同的细胞还能用于其它细胞增殖检测如结晶紫染色法,中性红染色法或DNA荧光染色法等。

Q5:CCK-8会对活细胞进行染色吗?

A5:不会进入细胞染色,整个显色反应都是在培养体系中进行的。另外,WST和WST-8甲臜都属于高度水溶性组分,反应结束更换新的培养液,即可清除外源组分。

Q6:做细胞活性检测时,每孔应该接种多少个细胞?

A6:当使用标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1000个/孔(100 μL培养基);检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2500个/孔(100 μL培养基)。

Q7:培养基的本底颜色如酚红会不会影响细胞活性的检测呢?

A7:不会的,培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。

Q8:能否用384孔板进行细胞增殖与活性检测的实验呢?

A8:可以,CCK-8产品的使用量为每孔培养基总体积的10%。建议先将CCK-8产品稀释一倍,然后加入培养基总体积的20%即可,这样可减少误差。

Q9:CCK只可以在450 nm波长处测OD值吗?

A9:可以在450 nm波长处测OD值,但是若无此波长的滤光片,可选择吸光度在430-490 nm之间的滤光片,但是450nm滤光片的检测灵敏度最高。

Q10:若是暂时不检测OD值,该如何处理?

A10:若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1 M的HCL 溶液或者1% w/v SDS 溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。

Q11:在加入CCK-8时,可否不更换培养基?

A11:一般情况下可以不更换培养基。但是如果培养基里有氧化还原性物质的话,有可能会产生误差,则必须更换培养基。

Q12:如果OD值太高,怎么解决?

A12:①适当减少细胞数量;②适当缩短加入CCK-8后的培养时间。

Q13:如果OD值太低,怎么解决?

A13:①适当增加细胞数量;②延长加入CCK-8后的反应时间。

Q14:使用CCK-8后发现OD值比较低,这是什么情况?

A14:数值跟培养基还有细胞类别有关系的,有些细胞本身分裂偏慢,那么OD偏低是正常的;只要在0-1之间,且产生了较好的线性,能判断药物对细胞的影响就好。如果觉得没有到达好的效果,那么可以通过延长时间来获得更好一点的结果。