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三色预染蛋白Marker(10-180KD)

产品货号:

AP13L052/AP13L053

产品规格:

250μL/5*250μL

产品价格:

198/798

产品描述

三色预染蛋白分子量标准包含了从10KD到180KD共10种高度纯化并预染的重组蛋白质(10,17,25,33,43,55,70,95,130,180KD,均带His标签),其中70KD条带为橙红色,10KD为绿色,其余条带为蓝色,适合作为SDS-PAGE和Western的蛋白质分子量标准。

本彩色预染蛋白质分子量标准已经配制在1×SDS-PAGE上样缓冲液中,直接使用,不要煮沸、稀释,也不需要加入还原剂处理。根据上样孔的大小,彩色预染蛋白质分子量标准通常每次上样5~10μL(5×1.5 mm胶孔5 μL足够),即可在电泳时、电泳后和转膜后观察到非常清楚的蛋白条带。

产品组分

产品名称

货号

规格

三色预染蛋白Marker(10-180KD)

AP13L052

250 μL

三色预染蛋白Marker(10-180KD)

AP13L053

5*250 μL

 

运输与保存

蓝冰运输。4℃短期保存,有效期2个月;-20℃长期保存,有效期36个月。

本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

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NP40裂解液(带抑制剂)
Q1:李记蛋白marker的推荐上样体积是多少?

A1:0.75mm和1.0mm建议3-5ul,1.5mm建议8-10ul。

Q2:在蛋白marker泳道中看到了一些额外的条带,应该怎么解决?

A2:(1)上样时,请注意确保相邻样品泳道没有交叉污染。蛋白质上样过多,可能会飘散到别的泳道,导致产生额外的条带,这个问题在使用银染凝胶时尤为突出。(2)Marker储存不当或反复冻融会导致蛋白质降解,产生额外条带。李记预染蛋白marker基本没有这种现象。

Q3:为什么预染蛋白marker电泳条带有时上面条带宽下面窄,不是一样的宽窄?

A3:请检查缓冲液的pH和更换pH标准品。   

Q4:我可以将你们的预染蛋白marker用于非变性凝胶电泳吗?

A4:不建议将李记的预染蛋白质分子量标准品用于非变性凝胶电泳。因为它们已经变性(在 SDS 样品缓冲液中)和预还原(通过专有方法),预染marker其标示分子量不代表在非变性凝胶电泳中的样品分子量,但是可以作为一个电泳相对标尺。 

Q5:在使用蛋白marker时发现条带弥散、模糊,可能是哪些原因?

A5:(1)配试剂尽可能使用超纯水。(2)选用合适浓度的凝胶并确认凝胶在正常有效期内。凝胶放置时间过长会影响分离效果,建议使用新配制的凝胶电泳。特别注意甲叉丙烯酰胺开封后多次称取会很快失效。(3)电压过高或电泳时间过长,产热过多导致电泳缓冲液温度升高。(4)电泳缓冲液陈旧,pH值不在缓冲范围内。尽量使用新鲜的电泳缓冲液,为了获得理想的结果建议在使用前预冷缓冲液。(5)存储或取用不当,引入外源污染,导致蛋白降解。建议使用干净的枪头和EP管分装marker,用干净的枪头、缓冲液和电泳设备进行实验。(6)蛋白marker存储太久并存储不当,或多次冻融取用。 

Q6:预染蛋白Marker在电泳后很清晰,但是转膜后颜色变淡,可能是什么原因?

A6:通常情况下,转膜后李记预染marker条带会更鲜亮,如果颜色变淡,可能有几种情况:  【原因1】:转印不完全。①操作不当,比如,转膜没有加冰袋,温度过高;胶和滤纸没夹紧。②转膜条件不适合,转膜时间过长可能透膜,转膜时间过短,蛋白可能残留在胶内。③膜没有充分活化,甲醇浓度太高易造成蛋白穿膜,转移到滤纸上;未活化可能也可能导致膜吸附蛋白能力不强。④膜孔径不适合,建议小分子蛋白使用0.22um膜。   【原因2】:很可能使用了特殊的转膜缓冲液;另外转膜液均不需要加SDS,若实验必须使用,建议SDS浓度不要超过0.02–0.04%。

Q7:蛋白质marker里小分子蛋白质条带穿膜。该如何解决这个问题?

A7:按照标准操作流程,通常都可得到良好结果。如果出现蛋白条带穿膜而过的情况,重点检查以下几个因素:   【因素1】:转印条件,建议适当降低电压、电流或缩短转印时间。   【因素2】:确保转膜缓冲液的甲醇浓度和时长合适,李记低分子量预染蛋白marker不需要加甲醇。转膜前使用浓度为10–20%的甲醇平衡PVDF膜,时间一般不超过30秒。   【因素3】:SDS浓度适当,使用李记生物的小分子量和大分子marker转膜时均不需要SDS,若实验必须使用,建议SDS浓度不要超过0.02–0.04%。过多的SDS会阻碍蛋白质与膜的结合。   【因素4】:检查膜的质量、孔径和靶标蛋白质的大小。如果您的目标蛋白质小于10 kDa,建议使用0.2μm及以下孔径的膜。

三色预染蛋白Marker(10-180KD)

产品价格:198/798

产品描述

三色预染蛋白分子量标准包含了从10KD到180KD共10种高度纯化并预染的重组蛋白质(10,17,25,33,43,55,70,95,130,180KD,均带His标签),其中70KD条带为橙红色,10KD为绿色,其余条带为蓝色,适合作为SDS-PAGE和Western的蛋白质分子量标准。

本彩色预染蛋白质分子量标准已经配制在1×SDS-PAGE上样缓冲液中,直接使用,不要煮沸、稀释,也不需要加入还原剂处理。根据上样孔的大小,彩色预染蛋白质分子量标准通常每次上样5~10μL(5×1.5 mm胶孔5 μL足够),即可在电泳时、电泳后和转膜后观察到非常清楚的蛋白条带。

产品组分

产品名称

货号

规格

三色预染蛋白Marker(10-180KD)

AP13L052

250 μL

三色预染蛋白Marker(10-180KD)

AP13L053

5*250 μL

 

运输与保存

蓝冰运输。4℃短期保存,有效期2个月;-20℃长期保存,有效期36个月。

本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

Q1:李记蛋白marker的推荐上样体积是多少?

A1:0.75mm和1.0mm建议3-5ul,1.5mm建议8-10ul。

Q2:在蛋白marker泳道中看到了一些额外的条带,应该怎么解决?

A2:(1)上样时,请注意确保相邻样品泳道没有交叉污染。蛋白质上样过多,可能会飘散到别的泳道,导致产生额外的条带,这个问题在使用银染凝胶时尤为突出。(2)Marker储存不当或反复冻融会导致蛋白质降解,产生额外条带。李记预染蛋白marker基本没有这种现象。

Q3:为什么预染蛋白marker电泳条带有时上面条带宽下面窄,不是一样的宽窄?

A3:请检查缓冲液的pH和更换pH标准品。   

Q4:我可以将你们的预染蛋白marker用于非变性凝胶电泳吗?

A4:不建议将李记的预染蛋白质分子量标准品用于非变性凝胶电泳。因为它们已经变性(在 SDS 样品缓冲液中)和预还原(通过专有方法),预染marker其标示分子量不代表在非变性凝胶电泳中的样品分子量,但是可以作为一个电泳相对标尺。 

Q5:在使用蛋白marker时发现条带弥散、模糊,可能是哪些原因?

A5:(1)配试剂尽可能使用超纯水。(2)选用合适浓度的凝胶并确认凝胶在正常有效期内。凝胶放置时间过长会影响分离效果,建议使用新配制的凝胶电泳。特别注意甲叉丙烯酰胺开封后多次称取会很快失效。(3)电压过高或电泳时间过长,产热过多导致电泳缓冲液温度升高。(4)电泳缓冲液陈旧,pH值不在缓冲范围内。尽量使用新鲜的电泳缓冲液,为了获得理想的结果建议在使用前预冷缓冲液。(5)存储或取用不当,引入外源污染,导致蛋白降解。建议使用干净的枪头和EP管分装marker,用干净的枪头、缓冲液和电泳设备进行实验。(6)蛋白marker存储太久并存储不当,或多次冻融取用。 

Q6:预染蛋白Marker在电泳后很清晰,但是转膜后颜色变淡,可能是什么原因?

A6:通常情况下,转膜后李记预染marker条带会更鲜亮,如果颜色变淡,可能有几种情况:  【原因1】:转印不完全。①操作不当,比如,转膜没有加冰袋,温度过高;胶和滤纸没夹紧。②转膜条件不适合,转膜时间过长可能透膜,转膜时间过短,蛋白可能残留在胶内。③膜没有充分活化,甲醇浓度太高易造成蛋白穿膜,转移到滤纸上;未活化可能也可能导致膜吸附蛋白能力不强。④膜孔径不适合,建议小分子蛋白使用0.22um膜。   【原因2】:很可能使用了特殊的转膜缓冲液;另外转膜液均不需要加SDS,若实验必须使用,建议SDS浓度不要超过0.02–0.04%。

Q7:蛋白质marker里小分子蛋白质条带穿膜。该如何解决这个问题?

A7:按照标准操作流程,通常都可得到良好结果。如果出现蛋白条带穿膜而过的情况,重点检查以下几个因素:   【因素1】:转印条件,建议适当降低电压、电流或缩短转印时间。   【因素2】:确保转膜缓冲液的甲醇浓度和时长合适,李记低分子量预染蛋白marker不需要加甲醇。转膜前使用浓度为10–20%的甲醇平衡PVDF膜,时间一般不超过30秒。   【因素3】:SDS浓度适当,使用李记生物的小分子量和大分子marker转膜时均不需要SDS,若实验必须使用,建议SDS浓度不要超过0.02–0.04%。过多的SDS会阻碍蛋白质与膜的结合。   【因素4】:检查膜的质量、孔径和靶标蛋白质的大小。如果您的目标蛋白质小于10 kDa,建议使用0.2μm及以下孔径的膜。