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EZ Mark非预染DNA Ladder(100~600bp)(精准)

产品货号:

AN33L237/AN33L238

产品规格:

100T/5*100T

产品价格:

100/420

产品描述

本产品是由6条非预染线状双链DNA片段组成,保存于1× Loading Buffer中, 条带密集,需用高浓度胶低电压电泳,适用于较精确确认DNA片段大小。

5uL/lane, 1xTAE buffer, 7v/cm, 30min

】:300 bp为加亮带,浓度为其他条带的2.5倍;5 μL产品中,每条带含量约50 ng,加亮带约125 ng。

产品组分

组分

100 T

5*100 T

EZ Mark非预染DNA ladder(100~600 bp)

100 T

5*100 T

5×Loading buffer

1 mL

1 mL

 

运输与保存

蓝冰运输。4℃短期保存,有效期6个月;-20℃长期保存,有效期12个月。

 

本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

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Q1:DNA条带不可见或很淡

A1:【原因①】:DNA Marker样品上样量不够。解决办法:按照说明书要求加样,或根据自己的实验调整加样量。   【原因②】:电泳时DNA跑出凝胶。解决办法:电泳时,将溴酚蓝跑到凝胶2/3处即可停止电泳。更小的DNA片段可能需要电泳的距离更短。   【原因③】:DNA条带被示踪染料遮盖。解决办法:选用不同示踪染料的电泳loading buffer,使待检测的DNA样品避开示踪染料的干扰,或适当降低loading buffer的用量。

Q2:DNA条带弥散或分离不开

A2:【原因①】:DNA有部分降解,核酸酶污染,保存不当。解决办法:每次吸取时更换灭菌枪头以免电泳缓冲液带入管中,用后于4℃保存,不可加热。   【原因②】:电泳时电压过低,使DNA条带发生扩散。解决办法:根据凝胶大小和电泳缓冲液类型,使用适当的电压进行电泳。   【原因③】:DNA上样量过大,条带变粗,条带间不易分离。解决办法:适当减少DNA上样量和加样体积。   【原因④】:琼脂糖凝胶浓度不合适。解决办法:参照各浓度的琼脂糖凝胶对应的有效分离范围重新制备凝胶。   【原因⑤】:凝胶质量较差,电泳缓冲液多次使用后失效。解决办法:换用高质量的琼脂糖制胶,更换缓冲液。   【原因⑥】:电泳后染色时间过长或拍照前放置过久。解决办法:电泳结束后及时观察拍照。

Q3:电泳时Marker前端条带容易变弱或丢失

A3:【原因①】:特指使用EB作为核酸染料时,由于EB与DNA的结合力比较弱,并且EB与DNA的电泳方向相反。当电泳时DNA条带跑到EB的前沿时,EB就会有很大一部分与DNA脱离,DNA条带将变弱。解决办法:电泳时,将溴酚蓝跑到凝胶2/3处即可停止电泳。Gelred核酸染料由于与DNA的结合非常牢固,不会出现电泳时间长DNA条带变弱的情况。

Q4:DNA条带异常

A4:【原因①】:不同样品的上样条件不同;上样量过大或过小。解决办法:选用相同的上样缓冲液,上样量尽可能接近;选择合适大小的上样孔,样品完全覆盖点样孔底部。   【原因②】:核酸样品纯度差,含有DNA结合蛋白或高浓度盐分。解决办法:酚/氯仿抽提或乙醇沉淀去除蛋白、盐分等杂质。   【原因③】:电泳缓冲液未完全浸没凝胶;凝胶中有气泡或污染物,点样孔质量差。解决办法:电泳缓冲液未完全浸没凝胶;凝胶中有气泡或污染物,点样孔质量差。   【原因④】:电压过高或电泳时间过长致使凝胶过热和DNA变性。解决办法:根据凝胶大小和电泳缓冲液类型,使用适当的电压进行电泳。

Q5:样品条带与DNA Marker条带大小不一致

A5:【原因①】:核酸降解或形成二聚体。解决办法:加热处理样品或重新制备。   【原因②】:相同分子量的DNA片段由于结构或序列的差异而有不同的迁移率。解决办法:判断DNA分子是否有特殊结构,如缺口、超螺旋、二聚体等;富含AT碱基的DNA迁移率比同分子量富含GC碱基的DNA片段慢。   【原因③】:梳子变形,点样孔不在同一水平线上。解决办法:制胶前检查梳子是否变形,使用完好的梳子制胶。   【原因④】:DNA的迁移不仅与实际大小有关,与是否结合有蛋白、离子状态、DNA的结构、凝胶等都有关。解决办法:如果使用SYBR Green I,GRred等核酸染料时,确定好核酸的电泳迁移率与DNA/染料的量的比例关系,当核酸染料量不足时,就会发生迁移率误差较大的情况。   【原因⑤】:样品中含有较高的盐离子浓度,引起较大的迁移误差。解决办法:对样品进行处理后上样电泳。   【原因⑥】:样品上样量与DNA marker条带的量相差较大或者体积相差较大时,会引起较大的迁移误差。解决办法:混和好Loading Buffer后的样品体积与DNA Marker的体积比较接近,这样更容易跑出理想的结果。

EZ Mark非预染DNA Ladder(100~600bp)(精准)

产品描述

本产品是由6条非预染线状双链DNA片段组成,保存于1× Loading Buffer中, 条带密集,需用高浓度胶低电压电泳,适用于较精确确认DNA片段大小。

5uL/lane, 1xTAE buffer, 7v/cm, 30min

】:300 bp为加亮带,浓度为其他条带的2.5倍;5 μL产品中,每条带含量约50 ng,加亮带约125 ng。

产品组分

组分

100 T

5*100 T

EZ Mark非预染DNA ladder(100~600 bp)

100 T

5*100 T

5×Loading buffer

1 mL

1 mL

 

运输与保存

蓝冰运输。4℃短期保存,有效期6个月;-20℃长期保存,有效期12个月。

 

本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

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A1:【原因①】:DNA Marker样品上样量不够。解决办法:按照说明书要求加样,或根据自己的实验调整加样量。   【原因②】:电泳时DNA跑出凝胶。解决办法:电泳时,将溴酚蓝跑到凝胶2/3处即可停止电泳。更小的DNA片段可能需要电泳的距离更短。   【原因③】:DNA条带被示踪染料遮盖。解决办法:选用不同示踪染料的电泳loading buffer,使待检测的DNA样品避开示踪染料的干扰,或适当降低loading buffer的用量。

Q2:DNA条带弥散或分离不开

A2:【原因①】:DNA有部分降解,核酸酶污染,保存不当。解决办法:每次吸取时更换灭菌枪头以免电泳缓冲液带入管中,用后于4℃保存,不可加热。   【原因②】:电泳时电压过低,使DNA条带发生扩散。解决办法:根据凝胶大小和电泳缓冲液类型,使用适当的电压进行电泳。   【原因③】:DNA上样量过大,条带变粗,条带间不易分离。解决办法:适当减少DNA上样量和加样体积。   【原因④】:琼脂糖凝胶浓度不合适。解决办法:参照各浓度的琼脂糖凝胶对应的有效分离范围重新制备凝胶。   【原因⑤】:凝胶质量较差,电泳缓冲液多次使用后失效。解决办法:换用高质量的琼脂糖制胶,更换缓冲液。   【原因⑥】:电泳后染色时间过长或拍照前放置过久。解决办法:电泳结束后及时观察拍照。

Q3:电泳时Marker前端条带容易变弱或丢失

A3:【原因①】:特指使用EB作为核酸染料时,由于EB与DNA的结合力比较弱,并且EB与DNA的电泳方向相反。当电泳时DNA条带跑到EB的前沿时,EB就会有很大一部分与DNA脱离,DNA条带将变弱。解决办法:电泳时,将溴酚蓝跑到凝胶2/3处即可停止电泳。Gelred核酸染料由于与DNA的结合非常牢固,不会出现电泳时间长DNA条带变弱的情况。

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A4:【原因①】:不同样品的上样条件不同;上样量过大或过小。解决办法:选用相同的上样缓冲液,上样量尽可能接近;选择合适大小的上样孔,样品完全覆盖点样孔底部。   【原因②】:核酸样品纯度差,含有DNA结合蛋白或高浓度盐分。解决办法:酚/氯仿抽提或乙醇沉淀去除蛋白、盐分等杂质。   【原因③】:电泳缓冲液未完全浸没凝胶;凝胶中有气泡或污染物,点样孔质量差。解决办法:电泳缓冲液未完全浸没凝胶;凝胶中有气泡或污染物,点样孔质量差。   【原因④】:电压过高或电泳时间过长致使凝胶过热和DNA变性。解决办法:根据凝胶大小和电泳缓冲液类型,使用适当的电压进行电泳。

Q5:样品条带与DNA Marker条带大小不一致

A5:【原因①】:核酸降解或形成二聚体。解决办法:加热处理样品或重新制备。   【原因②】:相同分子量的DNA片段由于结构或序列的差异而有不同的迁移率。解决办法:判断DNA分子是否有特殊结构,如缺口、超螺旋、二聚体等;富含AT碱基的DNA迁移率比同分子量富含GC碱基的DNA片段慢。   【原因③】:梳子变形,点样孔不在同一水平线上。解决办法:制胶前检查梳子是否变形,使用完好的梳子制胶。   【原因④】:DNA的迁移不仅与实际大小有关,与是否结合有蛋白、离子状态、DNA的结构、凝胶等都有关。解决办法:如果使用SYBR Green I,GRred等核酸染料时,确定好核酸的电泳迁移率与DNA/染料的量的比例关系,当核酸染料量不足时,就会发生迁移率误差较大的情况。   【原因⑤】:样品中含有较高的盐离子浓度,引起较大的迁移误差。解决办法:对样品进行处理后上样电泳。   【原因⑥】:样品上样量与DNA marker条带的量相差较大或者体积相差较大时,会引起较大的迁移误差。解决办法:混和好Loading Buffer后的样品体积与DNA Marker的体积比较接近,这样更容易跑出理想的结果。