产品描述
TRIzol的主要成分是异硫氰酸胍,它可以破坏细胞,使细胞RNA释放出来,同时保护RNA的完整性,因此,常用于动植物细胞RNA的提取。
产品组分
产品名称 |
规格 |
TRIzol |
100 mL |
运输与保存
常温运输。4℃避光保存,有效期12个月。
本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
蛋白酶K溶液
DNA提取, 核酸合成与提取
蛋白酶K
DNA提取, 核酸合成与提取
Q1:提取的RNA OD260/OD280<1.65
A1:(1)样品裂解时加入的TRIzol量偏少,造成蛋白分离不充分,可以再次对RNA溶液进行处理,以除去蛋白; (2)含有裂解液的样品经匀浆混匀后未在室温静置,或静置的时间不足5 min。这一步是从核酸中分离核蛋白的重要步骤; (3)相分离后,吸取上清液时不小心接触蛋白层造成污染 ; (4)RNA未充分溶解。
Q2:提取的RNA存在降解
A2: (1)使用的组织材料不够新鲜。提取RNA的组织材料应采用新鲜的组织材料,或将新鲜组织材料用液氮迅速冷冻后置于-80℃保存; (2)提取RNA时使用的试剂及器材中混有RNase; (3)提取的组织材料中含有大量的RNase,而TRIzol的添加量不够。
Q3:提取的RNA含量低
A3: (1) 加入TRIzol后匀浆不充分; (2)三相分层时,上清液取量过少; (3)RNA沉淀没有完全溶解; (4)在异丙醇沉淀或清洗步骤存在RNase污染。
Q4:提取的RNA中含有DNA污染
A4: (1)裂解组织或细胞使用的TRIzol量偏少,吸取了中间相; (2)材料中核酸含量高:脾脏、胸腺等组织中的核酸含量较高,可进行多次酚/氯仿抽提以去除多余的DNA。也可以在提取后加入DNase I处理,降解DNA; (3)使用的组织材料中含有大量的有机溶剂(如:等乙醇、异丙醇等)、高浓度的Buffer、碱性溶剂; (4)RNA沉淀条件不合适:使用异丙醇沉淀RNA时,加入的异丙醇与提取液的比例偏高,溶液的pH值偏小,都容易使 DNA 形成沉淀。
TR Izol
产品描述
TRIzol的主要成分是异硫氰酸胍,它可以破坏细胞,使细胞RNA释放出来,同时保护RNA的完整性,因此,常用于动植物细胞RNA的提取。
产品组分
产品名称 |
规格 |
TRIzol |
100 mL |
运输与保存
常温运输。4℃避光保存,有效期12个月。
本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
Q1:提取的RNA OD260/OD280<1.65
A1:(1)样品裂解时加入的TRIzol量偏少,造成蛋白分离不充分,可以再次对RNA溶液进行处理,以除去蛋白; (2)含有裂解液的样品经匀浆混匀后未在室温静置,或静置的时间不足5 min。这一步是从核酸中分离核蛋白的重要步骤; (3)相分离后,吸取上清液时不小心接触蛋白层造成污染 ; (4)RNA未充分溶解。
Q2:提取的RNA存在降解
A2: (1)使用的组织材料不够新鲜。提取RNA的组织材料应采用新鲜的组织材料,或将新鲜组织材料用液氮迅速冷冻后置于-80℃保存; (2)提取RNA时使用的试剂及器材中混有RNase; (3)提取的组织材料中含有大量的RNase,而TRIzol的添加量不够。
Q3:提取的RNA含量低
A3: (1) 加入TRIzol后匀浆不充分; (2)三相分层时,上清液取量过少; (3)RNA沉淀没有完全溶解; (4)在异丙醇沉淀或清洗步骤存在RNase污染。
Q4:提取的RNA中含有DNA污染
A4: (1)裂解组织或细胞使用的TRIzol量偏少,吸取了中间相; (2)材料中核酸含量高:脾脏、胸腺等组织中的核酸含量较高,可进行多次酚/氯仿抽提以去除多余的DNA。也可以在提取后加入DNase I处理,降解DNA; (3)使用的组织材料中含有大量的有机溶剂(如:等乙醇、异丙醇等)、高浓度的Buffer、碱性溶剂; (4)RNA沉淀条件不合适:使用异丙醇沉淀RNA时,加入的异丙醇与提取液的比例偏高,溶液的pH值偏小,都容易使 DNA 形成沉淀。