-
Q:可否使用与原先培养条件不同的培养基?
不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞可能无法立即适应,导致细胞状态不好甚至死亡。
-
Q:细胞冷冻管解冻培养时,是否应马上去除DMSO?
除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外,绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞),在解冻之后,可直接放入10-15ml新鲜培养基,待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO即可,如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。
-
Q:如何做血清的梯度替换?
替换方法为:完全培养基配置过程中先用25%新血清与75%原血清进行混合,培养传代1-2次;而后用50%新血清与50%原血清混合培养传代;再用75%新血清与25%原血清混合培养传代;最后完全使用新血清培养传代。
-
Q:血清的热灭活是必须的吗?
非必须血清不需要做热灭活,而少数对补体敏感的细胞实验,如某些免疫学实验或腺病毒包装等,可酌情对血清进行热灭活操作。
-
Q:如何判断血清污染?
(1)检查并判断外包装是否有破损; (2)将血清接种到血酯板上,培养后看是否有菌落形成; (3)可通过质量检测试剂盒检测结果判定,如支原体检测试剂盒等。血清污染主要包括细菌污染、真菌污染和支原体污染。
-
Q:血清中的小黑点是“黑胶虫”么?
血清解冻过程温差过大、经反复冻融或通过热灭活处理后更容易产生沉淀,这些沉淀物在镜下观察时有一些会呈现以布朗运动的小黑点,业内流行一种“黑胶虫”污染的说法。小L推荐李记黑胶虫去除剂Cat:AC16L121
-
Q:血清解冻后发现絮状沉淀该如何处理?
血清解冻过程中温差带来了脂蛋白变性和纤维蛋白析出,沉淀本身不会影响血清质量,也不会对实验结果造成影响。但如必须处理沉淀,则可通过离心方式去除,如500-1000×g离心5-10 min。
-
Q:如何进行血清的程序性解冻?
程序性解冻血清可以确保血清制品质量的稳定性,且不会因为温差过大而析出过多蛋白等沉淀。程序性解冻方法是于实验开始之前将冷冻的血清置于4℃冰箱中融解,并且在解冻过程中每隔1小时摇匀一次,使温度与成分均一,减少沉淀析出,直至全部解冻,然后再移入室温条件下使用。
-
Q:血清长期储存的条件和方法是什么?
血清如需长期保存,则必须储存于-10℃或更低温冰箱中,建议存放于-20℃的冰箱中。研究表明储存在-80℃条件下的血清在性能方面变化不大,但由于解冻时温差过大,会导致析出更多沉淀,使得背景杂乱,因此血清长期保存不建议处于-80℃条件下。如果近期会频繁使用血清,我们建议不要在4℃条件下存放超过1个月,若一次无法用完整瓶建议分装后保存,且要避免反复冻融。
-
Q:快速封闭液好用,但放久了有沉淀,摇一摇又没了?
是Tween20,它室温放久了会慢慢氧化沉淀,晃一晃即可。4℃保存会比较稳定不出沉淀。
"Heyuan Liji" is a joint venture between Heyuan Biotechnology (stock code: 688238) and Liji Biotechnology, specializing in the "Liji Biotechnology" and "Life-ilab" reagent brands