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敲除细胞株构建
原文链接：和元生物——敲除细胞株构建
Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats（CRISPR）/Cas9是细菌和古细菌在长期进化而形成的一种适应性免疫防御机制，CRISPR/Cas9系统可以用于各种基因组的编辑。CRISPR/Cas9系统会通过小导向RNA(sgRNA)对切割区域进行识别，并利用Cas9内切酶实现在识别位点中间预测的位置切割，造成DNA双链断裂，在细胞进行易错修复后造成随机的突变。CRISPR/Cas9系统其突变效率高、灵活简单，周期短，成本低，已经被广泛的应用于基因编辑的研究。CRISPR/Cas9系统应用的领域是基因敲除株系构建和基因敲除动物的研究。
公司可提供项目服务包括：CRISPR/Cas9实验方案设计、CRISPR/Cas9基因敲除载体构建、CRISPR/Cas9基因敲除载体病毒包装、CRISPR/Cas9基因敲除细胞株构建
服务特点：
1 定制特定基因敲除细胞系只需提供基因名称；
2 快速获得有效sgRNA，基因编辑效率高；
3 实验周期短；
4 可根据需要提供CRISPR/Cas9慢病毒包装服务
操作流程
1 靶向目的序列sgRNA的设计、载体构建及活性验证
2 目的细胞系共转染，初步筛选混合克隆
3 铺单克隆，单克隆筛选及鉴定细胞基因型
4 阳性细胞株的扩增
