原文链接:和元生物——基因干扰
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是正常生物体内抑制特定基因表达的一种现象,当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链RNA(double stranded RNA,dsRNA)时,该mRNA发生降解而导致基因表达沉默的现象。外源dsRNA 进入细胞后产生的小分子干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)的反义链和多种核酸酶形成了沉默复合物(RNA-induced silencing complex,RISC),RISC具有结合和切割mRNA的作用而介导RNA干扰的过程。
载体选择(部分)
病毒载体的选择,根据实验的需求参考慢病毒、腺相关病毒、腺病毒、逆转录病毒等。
载体类别 | 编号 | 载体元件 |
慢病毒干扰 | GL401 | pCLenti-U6-shRNA-CMV-Puro-WPRE |
GL404 | pCLenti-U6-shRNA-CMV-EGFP-WPRE | |
GL407 | pCLenti-U6-shRNA-CMV-EGFP-F2A-Puro-WPRE | |
GL408 | GL408 pCLenti-U6-shRNA-CMV-mCherry-F2A-Puro-WPRE | |
H7615 | pCLenti-U6-shRNA-CMV-mCherry-F2A-BSR-WPRE | |
腺病毒干扰 | DKD001 | pADV-U6-shRNA-CMV-EGFP |
DKD004 | pADV-U6-shRNA-CMV-mCherry | |
腺相关病毒干扰 | AKD001 | pAAV-CBG-EGFP-3xFLAG-WPRE-H1-shRNA |
AKD003 | pAAV-CBG-mCherry-3xFLAG-WPRE-H1-shRNA | |
H12663 | pAAV-U6-shRNA/spgRNA v2.0-CMV-EGFP-WPRE |
服务简介
根据客户提供的目的基因,针对该基因设计3个siRNA靶点,再将这些靶点构建到相关载体,针对病毒载体,包装生产的病毒颗粒可以直接用于感染细胞或者动物实验。
病毒载体服务流程