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AF488标记的鬼笔环肽的介绍、优势与操作步骤
鬼笔环肽是从一种菌类 Amanita Dhalloides 所提取出来的环肽。它与 F-actin 竞争性的结合。荧光标 记的鬼笔环肽在纳克水平就可与 F-actin 选择性的结合并且易溶于水，为检测组织切片，培养细胞和无细胞 体系中的 actin 的定位和定量提供了非常方便的标记方法。 而Alexa Fluor 488 标记的鬼笔环肽，可发出高亮度、稳定的绿色荧光，染色反应特异性强，对 比性高，适合用作 F-actin 的定性和定量检测。
与 Actin 抗体比较，Alexa Fluor 488 鬼笔环肽具有如下优点：
1、与 actin 亚单位一比一结合，并且不与 G-actin 结合，具有比 Actin 抗体更好的染色效果。
2、且本品的结合没有物种差异性，适用性广泛。
3、鬼笔环肽标记的非特异性信号可忽略，因而图像的反差较好。
4、染色与用于细胞分析的其他荧光染色完全兼容，包括荧光蛋白、纳米晶体和其他 Alexa Fluor 偶联 物（包含 Alexa Fluor 偶联二抗)。 经本品结合后的 F-actin 仍能维持 actin 自身具有的许多生物学特性
488鬼笔环肽染色产品推荐
[品牌] 和元李记生物
[产品] 活组织冻存复苏试剂
[货号] AC05L463
[规格] 1 T
488鬼笔环肽染色产品使用方法
第1：准备1× Alexa Fluor 488标记鬼笔环肽工作液吸取1 μL 1000×Alexa Fluor 488标记鬼笔环肽存储液到1 mL 含有1% BSA的PBS缓冲液中即可得到1×工作液。
第2：细胞染色步骤
(1) 细胞培养过夜或更长，使其密度达到50~60% 汇合度。
(2) 吸掉培养液，37℃ 预热的1×PBS（pH 7.4）清洗细胞2次。
(3) 使用含有3-4% 甲醛的PBS溶液进行细胞固定，室温固定10~30 min。
(4) 室温条件下，用PBS清洗固定好的细胞2~3次，每次10 min。
(5) （可选）：室温条件下，用溶于PBS的0.1% Triton X-100溶液透化处理3~5 min，从而增加其通透性。
(6) 室温条件下，用PBS清洗细胞2~3次，每次10 min。
(7) 每孔加入 Alexa Fluor 488标记鬼笔环肽工作液100 μL /孔（96孔板），室温避光染色20~90 min，夏季时间相对短些。
(8) 用PBS清洗细胞3次，每次5 min，去除掉多余的Alexa Fluor 488标记鬼笔环肽。
(9) （可选）：加入足量的即用型DAPI溶液对细胞核进行复染，如：100 μL /孔（96孔板），室温3~5 min。用PBS清洗细胞2次，每次5 min。
(10) 于荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察，选择Alexa FluorTM 488激发/发射滤片和/或DAPI激发/发射滤片（Ex/Em=364/454nm）。
AF488标记鬼笔环肽可以用于标记和检测神经元表面受体。它还可以用于标记和检测细胞表面的免疫分子，从而研究免疫细胞的活化和调控机制。
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