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牛血清白蛋白BSA的主要作用与注意事项
牛血清白蛋白,第五组分 (BSA, Fraction V),也称Bovine albumin,或Cohn Fraction V,简称BSA。BSA除了有着极其广泛的实验室应用外,还常在免疫实验中用作封闭剂,包括ELISA、WB(Western Blot)。作为载体蛋白,将其交联于半抗原和其他弱抗原可以使它们在抗体生产中具有更强的免疫原性。在限制性内切酶消化反应中,BSA常常被用作一些酶的反应稳定剂,并且能防止它粘附到管壁和枪头上。BSA也常用于生物制药的生产过程或者作为营养物用于细胞和微生物培养。除此之外,还作为蛋白定量检测的标准品使用。
牛血清白蛋白的作用
1、维持渗透压、提供pH缓冲、起载体作用;
2、作为蛋白定量检测的标准品使用,如WB中的蛋白定量等;
3、常规免疫实验中作封闭试剂使用,包括ELISA、WB和IHC等。
BSA在内切酶的缓冲液的作用
1、BSA是酶的稳定剂,防止酶的分解和非特异性吸附。
2、BSA能减轻有些酶的变性,能减轻有些不利环境因素如加热,表面张力及化学因素引起的变性的至于作用机理我不是很清楚,可能是因为它结构中有17个二硫键,和一个巯基,巯基的化学反应很活泼,二硫键有抗氧化还原的作用,因此可与多种阳离子,阴离子和小分子结合。
3、BSA能防止酶吸附到管壁而损失。
BSA使用中需要注意的事项
1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
2. 第五组分在应用时浓度要适宜,不可太高。且最好现配现用,已经配好的溶液即使是在 -20℃ 环境中保存,一段时间后也会造成结果偏高。
3. 牛血清白蛋白遇热容易凝固,当加热到 50℃ 或以上时,白蛋白会迅速形成疏水性聚集体,并不能通过冷却恢复到单体,虽然在某种程度上低温聚合也会发生,但比率相对较低。
4. 天然牛血清白蛋白(BSA)的等电点为4.6~5.8,经无水乙二胺(EDA)和碳化二亚胺(EDC)反应,改性后的牛血清白蛋白等电点为8.6 。
牛血清白蛋白,第五组分 (BSA, Fraction V),可以满足大部分常规实验需求,如用作免疫封闭剂、组织细胞培养添加剂、蛋白酶稳定剂以及蛋白定量标准品。