常见问题-试剂产品问题解答-和元李记

Q：转染试剂的转染效率如何，毒性如何？

有些细胞如 293T、Hela 等转染效率都是很高；阳离子聚合物转染试剂对细胞毒性很小，并可以随着细胞生长代谢掉，其与细胞共孵育时间更长，转染效率也有进一步提升。
Q：胎牛血清与其他牛血清的区别？

1、血清是一种复杂的混合物，由血浆去除纤维蛋白而得，为细胞培养和生长提供各类支持和保护作用，且其中成分组成随供血动物的年龄不同有较大差异。
2、胎牛血清取自剖腹产的胎牛；新生牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10-30天的小牛。胎牛血清因胎牛还没有接触外界，血清中所含对细胞有害的成分如抗体和补体等是最少的，故其品质比其他种类牛血清更好。
Q：血清在细胞培养中的有哪些主要作用？

1、提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。
2、提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。
3、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。。
4、是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5、起酸碱度缓冲液作用。
6、提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。
Q：什么是Annexin V/PI测定？

Annexin V/PI测定用于通过annexin V标记区分早期凋亡细胞和通过丙碘胺（PI）标记区分坏死/死亡细胞。在早期凋亡阶段，细胞膜开始失去不对称性，导致磷脂酰丝氨酸（PS）转位到膜的外表面，在此处annexin V共轭物可以检测到它。然而，在细胞膜破裂的情况下，例如坏死，annexin V共轭物可以进入并结合内层膜中的PS残基，导致假阳性结果。因此，建议使用不透过细胞膜的核染料（如PI）与annexin V共轭物一起使用。这使用户可以区分早期凋亡细胞（annexin V染色）、晚期凋亡细胞（annexin V和PI染色）和坏死细胞（仅PI染色）。
Q：Annexin V和TUNEL有什么区别？

末端脱氧核苷酸转移酶 dUTP 缺口末端标记 (TUNEL) 是一种染色方法，用于识别细胞内 DNA 片段化位点——晚期细胞凋亡的标志性特征。它使用酶末端脱氧核苷酸转移酶 (TdT) 将修饰的 dNTP（例如 dUTP）连接到片段化 DNA 链的 3'-羟基末端。dNTPs 通常用荧光团修饰以促进量化和/或可视化。
Annexin V 染色通过结合由于细胞膜不对称性丧失而暴露在细胞外的 PS 残基来识别细胞凋亡的早期阶段。Annexin V 通常用 FITC 等荧光团标记，以促进凋亡细胞的检测。
Q：细胞活性氧检测实验是否适用于所有类型的细胞？

细胞活性氧检测实验通常适用于大多数类型的细胞，包括哺乳动物细胞和微生物等。然而，不同类型的细胞可能对活性氧产生和处理方式有所差异，因此在进行实验时应针对不同类型的细胞进行优化和验证。
Q：如何选择适当的活性氧检测试剂？

选择活性氧检测试剂时，需考虑细胞类型、实验目的和检测方法等因素。DCFH-DA适用于荧光显微镜观察，ROS-Glo试剂适用于流式细胞仪分析。根据实验要求选择合适的试剂。
Q：液体培养基可以放-20℃保存吗？

不可以！因为在-20℃下，培养基中的盐容易析出，培养基融化后，有的盐可能无法重新溶解，从而导致培养基渗透压降低，培养细胞时，细胞容易破裂而死亡。
Q：无血清培养基和普通培养基有什么区别？

无血清培养基是一种不需要添加血清即可维持细胞生长的合成培养基，可能含有少量或大量蛋白组分。普通培养基则通常需要添加胎牛血清或其他动物血清来促进细胞生长。
无血清培养基的基本成分包括基础培养基和添加组分，如纤维粘连蛋白、胰岛素、转铁蛋白等，用于维持细胞生长所需的营养和因子。
Q：胎牛血清4℃可以放多久？
胎牛血清在4℃的条件下，一般可以保存6-12个月。但这并不是绝对的，实际的保存时间会受到多种因素的影响，包括血清的质量、容器的密封性、冰箱的稳定性等。为了保证血清的质量，建议尽量在购买后3个月内使用，如果需要长期保存，最好冷冻在-20℃或更低的温度下，这样可以保存1-2年甚至更久。但请注意，每次取用时应避免反复冻融，以防止蛋白质和营养成分的损失。在使用前，应详细阅读产品说明书，并按照供应商的建议进行操作。

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