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预染蛋白质Marker在转印过程中条带在膜上褪色?
褪色最可能是由于封闭/洗涤液中的洗涤剂将一些蛋白质从膜上洗脱造成的。染料本身不会从蛋白质上洗脱,因为它们是共价结合的。已经发现较小孔径的膜可以在封闭和洗涤过程中更好地保留蛋白质,因此,为了获得绝佳的分辨率和蛋白质保留率,推荐使用0.2 µm代替0.45 µm的膜。转印后,可以用铅笔在膜上圈出预染条带,从而在封闭和处理后仍可辨认条带位置。