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Language: English

细胞周期检测试剂盒Plus (Cell Cycle and Apoptosis Kit Plus)

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Product Item Number
Product Specifications
original price
  • AC12L553
    50T
Product Description Product FAQ COA Product Literature MSDS

产品描述

细胞周期检测试剂盒升级版(Cell Cycle Assay Kit Plus)采用RedNucleus I染色法检测细胞周期,RedNucleus I是一种远红外核酸染料,具有细胞膜透性,可快速进入活细胞,特异结合DNA,对活细胞进行周期检测,且无需RNase的消化。与传统的碘化丙啶染色(PI staining)方法相比,细胞无需破膜或固定,操作更加简便。

RedNucleus I是一种双链DNA的荧光染料,与双链DNA结合后的荧光强度和双链DNA的含量成正比。可通过流式细胞仪测定细胞内DNA含量,然后根据DNA含量的分布情况,进行细胞周期分析。RedNucleus I 染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2,正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。此外,RedNucleus I与Horizon BV / BUV、FITC和R-PE等染料兼容,可在样品染色后进行周期检测。

本试剂盒通常应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期检测,如果用于组织的细胞周期检测,则必须先把组织消化成单细胞状态。

订购信息

产品名称

货号

规格

细胞周期检测试剂盒Plus (Cell Cycle and   Apoptosis Kit Plus)

AC12L553

50 T

产品组分

组分

规格

A.         染色缓冲液(10×)

10 mL

B.         RedNucleus I 染色液

200 μL

运输与保存

蓝冰运输。-20℃保存,组分B需避光保存。有效期24个月。【注】:短期使用请保存于4℃。

使用方法

1.    细胞样品的准备:

(1)    (此步骤是针对贴壁细胞,若为悬浮细胞,可直接进行第2步)用胰酶消化细胞,加入细胞培养液,轻轻吹散细胞后,收集到离心管内。

(2)    1000 g左右离心3-5 min,沉淀细胞。小心吸除上清,加入约1 mL冰浴预冷的1×的染色缓冲液(将10×的染色缓冲液用diH2O 按1:10 稀释),重悬细胞。重复一次。

(3)    1000 g左右离心3-5 min,沉淀细胞。弃上清后,加入1 mL 培养基重悬细胞(对于固定细胞,也可用1×PBS 重悬)。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞,避免细胞成团。

2.    染色:每管细胞样品中加入4 μL 的RedNucleus I 染色液,缓慢并充分混匀,室温避光孵育20 min(或在37℃ 避光孵育5-10 min)。

3.    流式检测和分析:用流式细胞仪在638 nm 处激发,推荐在RL3或FL4 通道检测,也可使用RL1、RL2通道检测。采用适当分析软件进行细胞DNA含量分析和光散射分析。

注意事项

1.   本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

2.   本产品适用于活细胞和固定细胞周期检测。如需固定,推荐使用冰浴预冷75-80% 的乙醇过夜固定细胞。

3.   荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

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