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产品描述
DAPI是一种常用于细胞核染色的蓝色荧光染料,优先结合双链DNA,尤其是与小沟中的AT区域结合。此外,DAPI亦可结合RNA,但结合模式不同。与DNA复合物相比,DAPI/RNA复合物的荧光发射波长较长(约500 nm),而DAPI/DNA复合物的发射波长为约460 nm。
在多色荧光染色技术中,DAPI作为常用的核染色剂,因其蓝色荧光能够与绿色、黄色或红色荧光形成鲜明对比。DAPI具有较高的细胞核特异性,几乎不染色细胞质。本染液浓度为3 μM,非无菌制剂。
订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 |
DAPI染液 | AS21L122 | 10mL |
DAPI染液 | AS21L123 | 50mL |
运输与保存
蓝冰运输。-20℃避光保存,有效期 12个月。
使用方法
1. 贴壁细胞的复染
1.1 样品准备
1.1.1 使用适当的固定剂固定贴壁细胞样品,确保细胞形态保持完整。固定后,使用DAPI染料进行细胞核核染色。
1.2 复染流程
1.2.1 用PBS短暂平衡样品;
1.2.2 加入适量的DAPI染液,确保完全覆盖细胞,孵育3-5min;
1.2.3 用PBS漂洗样品数次,轻轻吸去多余液体,避免细胞干燥;
1.2.4 在配有合适滤片的荧光显微镜下观察样品。
2. 悬浮细胞的复染
2.1 样品准备
2.2.1 收集悬浮细胞2×105~1×106个细胞,通过离心收集沉淀,弃去上清;
2.2.2 轻弹试管,使沉淀在剩余的液体中重悬,在加入1mL PBS;
2.2.3 将细胞悬液缓慢的加入4mL乙醇中,同时以最大的速度涡旋。将含有细胞的乙醇在-20°C放置5-15min;
2.2.4 通过离心,使细胞沉淀,弃上清;
2.2.5 轻弹试管,使沉淀松散,在加入5ml PBS。
2.2 复染流程
2.2.1 离心使细胞沉淀,弃上清,轻弹试管,使沉淀松散,加入2~3mL DAPI染液;
2.2.2 室温下孵育15min;
2.2.3如果使用荧光显微镜观察细胞,将样品离心后,弃上清,用新鲜的缓冲液重悬沉淀。在显微镜载片上滴加一滴细胞悬液,加盖片后观察。
注意事项
1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 使用观察蓝色荧光的荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
4. 自备PBS,固定液及抗荧光淬灭封片液。
5. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
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本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
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