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产品描述
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴定染色法,媒染剂碘液进入菌体后与结晶紫结合,革兰氏阳性菌对碘与结晶紫摄取量多且牢固,不易被酒精脱色。革兰氏阴性菌对碘与结晶紫摄取量少,不牢固,易被酒精脱色。为观察方便,脱色后再用一种红色染料,如碱性番红进行复染。阳性菌仍为紫色,阴性菌则被染为红色。
订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 |
革兰氏染色试剂盒 | AS42L121 | 100mL |
产品组分
组分 | 规格 |
A. 草酸铵结晶紫染液 | 100mL |
B. 革兰氏碘液 | 100mL |
C. 脱色液 | 100mL |
D. 番红复染液 | 100mL |
运输与保存
常温运输。常温避光保存,有效期12个月。
使用方法
1. 准备
(1) 使用无菌接种环,挑取一薄层样品置于载玻片上并涂片;
接种环通过酒精灯火焰灼伤而达到无菌,使用前可以冷却30s;
如果检测的组织样品可能被细菌污染,或者在培养基中有细菌生长,可直接用接种环挑取样品并置于载玻片上。如果检测培养板上生长的细菌克隆,可现在载玻片上滴加一滴无菌水,然后挑取一个克隆,并将其置于水中。
(2) 使涂片自然干燥,热固定,在酒精灯的火焰上略过2-3次;注:不要将载玻片持续置于火焰上,以免样品过热。
2. 染色
(1) 将热固定后的载玻片置于装有草酸铵结晶紫染液的染缸中,使载玻片在染缸中站立1min。
(2) 使用自来水轻轻的洗载玻片5s,抖掉多余的水。
(3) 将载玻片置于装有革兰氏碘液的染缸中1min,水洗,并抖掉多余的水。
3. 脱色和复染
(1) 略微倾斜载玻片,将脱色液滴加在载片上端,使其下滑通过样品区,直至紫色出现为止。重要的是,脱色既不能过度也不能不足。如果脱色过度,可将革兰氏阳性菌误判为阴性菌;如果脱色不足,可将革兰氏阴性菌误判为阳性菌。
(2) 水洗5s,抖掉多余的水分。
(3) 使用番红复染液染色1min。
(4) 水洗5s,抖掉多余的水分。允许其自然干燥,或者用吸水纸小心的将水分吸干。
4. 镜检:在油镜(900×~1000×)下观察细菌以区分革兰氏阳性菌和阴性菌。不要使用盖玻片,在载玻片中间加一滴油观察细菌。如果需要,载玻片可保存于载片盒中数月再观察。
染色结果:革兰氏阳性菌染为蓝紫色,革兰氏阴性菌染为红色。
注意事项
1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 革兰氏染色的关键在于严格掌握酒精的脱色程度,如脱色过度,阳性菌可被误染为阴性菌;而脱色不够时,阴性菌可被误染为阳性菌。此外,菌龄也影响染色结果,如阳性菌培养时间过长,或已死亡及部分菌自行溶解,都常呈阴性反应。
4. 标本涂片不能太厚。
5. 玻片通过火焰温度不能过高。
6. 若涂片较厚,延长脱色时间,直至不再出现紫色为止。
7. 碘液变透明,则不能使用。
8. 水洗时动作用轻柔,沿载玻片对角线方向用洗瓶冲洗,以免把菌体冲掉。
9. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
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本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
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