一站式鼠尾基因快速鉴定试剂盒（Direct Mouse Genotyping Kit）-直扩PCR-和元李记

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一站式鼠尾基因快速鉴定试剂盒（Direct Mouse Genotyping Kit）

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产品货号

产品规格

原价

AN11L217

200T

380
AN11L218

500T

880

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产品描述

一站式鼠尾基因型快速鉴定试剂盒适用于从鼠尾、鼠耳、脚趾或其它组织快速提取基因组DNA，并进行PCR扩增，从而实现快速、便捷且准确的小鼠基因型鉴定(genotyping)及基因组的相关分析。

本试剂盒可在10-15 min内快速消化和提取鼠尾组织样品的基因组DNA，有效简化了鼠尾基因组DNA获取过程。本试剂盒还提供了预配制的2X PCR Master Mix (Green)，内含Taq DNA Polymerase，PCR Buffer，dNTP和上样缓冲液，只需加入适量引物、模板和水即可进行PCR扩增。PCR结束后，产物可直接进行电泳分析，方便快捷。

推荐组织用量

3~5mm2 小鼠尾尖 (2~3mm)

5~10mm2小鼠耳朵 (3~5mm)

1个小鼠脚趾

订购信息

产品名称	货号	规格
一站式鼠尾基因快速鉴定试剂盒（Direct Mouse Genotyping Kit）	AN11L217	200 T
一站式鼠尾基因快速鉴定试剂盒（Direct Mouse Genotyping Kit）	AN11L218	500 T

产品组分

组分	AN11L217	AN11L218	保存条件
A. DNA extraction solution	15 mL	40 mL	室温
B. Stop solution	15 mL	40 mL	室温
C. 2X PCR Master Mix	3*1 mL	8*1 mL	-20℃

运输与保存

蓝冰运输。组分按照保存条件保存，有效期12个月。

使用方法

1. 基因组提取步骤：

(1) 向每个样本中加入70 μL DNA extraction solution，确保组织完全浸没在溶液中。

(2) 在95℃的金属浴或水浴中裂解处理10-15 min。裂解完成后，组织在外观上仍然保持完整，但足量的基因组DNA已成功释放，不影响后续的PCR实验。

(3) 裂解后，短暂离心去除管盖内壁的液滴，然后在室温下静置2 min。随后加入70 μL终止液（Stop solution），轻轻混匀，终止裂解反应。

(4) 12000 rpm离心2 min，取上清液作为PCR模板。上清液在消化后可在4℃保存一个月，或在-20℃下保存一年。

2. PCR扩增步骤：

(1) 将2X PCR Master Mix（Green）置于冰浴或冰盒内，并准备PCR反应所需的引物、模板和水。

(2) 参考表1，在冰浴上配制PCR反应体系。

(3) 使用移液器轻轻吹打或轻微漩涡混合（Vortex）以确保充分混匀。随后，在室温下短暂离心几秒钟，使液体集中于管底。

(4) 将配制好的PCR反应体系放置在PCR仪中，启动PCR反应。

(5) 可参考表2设置PCR反应程序参数。PCR反应结束后，可直接进行琼脂糖凝胶电泳。

表1：PCR反应体系

成分	用量
Template	2 μL
Forward Primer (10 μM)	0.5 μL
Reverse Primer (10 μM)	0.5 μL
2x PCR Master Mix	10 μL
ddH2O	7 μL
Total	20 μL

表2：PCR反应程序设定

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94 ℃	2 min	1
变性	94 ℃	30s	30~35
退火	55 ℃	30s
延伸	72 ℃	30s (1kb/min)
终延伸	72 ℃	10 min	1
临时保存	4 ℃	forever	─

注意事项

1. 本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。

2. PCR产物少或没有条带。引物设计不佳是最常见的问题，需合理优化引物；在室温下配置反应体系易引发非特异性扩增，建议在冰浴中进行；退火温度不当可能影响结果，建议使用温度梯度PCR仪优化，或通过多次PCR反应找到最佳温度；延伸时间不足。建议每1 kb片段延伸1 min，难以扩增的片段可延长至1.5-2 min。