“和元李记”由和元生物 (股票代码:688238) 和李记生物合资成立的,主营“李记生物”“Life-ilab”试剂品牌
产品描述
Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒为Annexin V与PI联合使用的试剂盒,用于检测细胞凋亡早期的发生,可区分凋亡早期凋亡细胞和晚期凋亡或坏死细胞。
Annexin V为胞内蛋白膜联蛋白家族成员,以钙离子依赖的方式选择性与磷脂酰丝氨酸(PS)结合。PS正常分布在细胞膜内侧。PS外翻到细胞膜外是不同类型的细胞在凋亡早期的明显特征,用带有FITC标记的Annexin V,即Annexin V-FITC,可通过流式细胞仪或荧光显微镜检测到这一重要特征。FITC呈现黄绿色荧光。
PI(Propidium Iodide, 碘化丙啶)是一种可对 DNA 染色的细胞核染色试剂,在嵌入DNA 后释放红色荧光。PI不能穿透完整的细胞膜,但可以穿透坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞。
Annexin V-FITC与PI联合使用时,PI 被排除在活细胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被 FITC 和PI 结合染色呈现双阳性(Annexin V+/PI+)。
FITC最大吸收波长和激发波长分别为494nm和518 nm,PI-DNA复合物的最大吸收和发射波长分别为535 nm和617 nm。
1、 Annexin V探针检测灵敏度达纳摩尔浓度水平,可检测出极少量的凋亡细胞; 背景干扰少,染色清晰;
2、批次间性能稳定;
3、多种多样的凋亡检测试剂盒,满足不同客户的各种需求。
订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 |
Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒 | AC12L033 | 100 T |
产品组分
组分 | 规格 |
A. Annexin V-FITC | 500 μL |
B. Propidium iodide | 1 mL |
C. Binding Buffer(1×) | 100 mL |
运输与保存
蓝冰运输。4℃避光保存,有效期18个月。【注】:不可冷冻。
本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
Q:PI染色不上的原因?
A:建议看下药物作用浓度,PI不能穿透完整的细胞膜,但可以穿透坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞,如果药物浓度比较低,则活细胞和早期凋亡细胞比例会比较多,晚期凋亡比较较少,PI染色比例低;
Q:PI染色不上解决方法?
A:1、染色时Binding Buffer需要现用现配,用去离子水稀释,其缓冲液中有可促进染料染色效果; 2、建议实验中用凋亡细胞做单染组,分别看下单染情况,这样后续划十字门结果分析更准确; 3、细胞总数建议在 1×10^5 cell,,如果每组细胞数量比较多也会影响染色效果,加入5-10ul PI, 可以适当增加调整PI染料的加入量,室温或者37℃孵育15min左右。 4、流式检测时注意检测通道的选择,如无PI通道,也可以选择波长相近的PE或PRECP进行。 5、检测时调整好电压和阈值,一般李记的阈值建议设置在10^6左右。
Q:FITC染色不上的原因分析及解决办法?
A:1、 细胞团没分开。 解决方法:建议离心力设置在500-1000g,如果离心力太低,收集到的都是正常细胞,凋亡的细胞和碎片会丢失这样凋亡率会低; 2、 没有做单染对照。 解决方法:每家试剂盒荧光值和背景不一样,十字门位置都不一样。如:对比李记,国产美*偏左,国产翌*偏右,因此建议客户做单染划门; 3、 细胞太多。 解决方法:图片上无信号,意味着没检测到,也就是信号超过检测范围了,建议设置参数10000个细胞数; 4、 FITC染不上。 解决方法:一般冻存会对FITC有影响,李记产品建议是不可冻存; 5、染料浓度和作用时间,孵育条件等也是影响染色的主要原因。解决方法:不同细胞不会完全一样,都有最佳条件,需要摸索确认 6.细胞本身凋亡刺激的不够。 解决方法:调整下药物作用时间和浓度 7.细胞本身状态,例如细胞过度增殖的细胞对凋亡刺激不敏感。 解决方法:确认细胞状态 8.贴壁细胞消化时间过长,膜表面PS受损, Annexin V结合位点变少。 解决方法:调整细胞消化时间,不要过度消化
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