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G418 Sulfate (G418硫酸盐),也称作Geneticin (遗传霉素)、G418、G 418或者G-418,是一种结构类似于庆大霉素B1 (Gentamycin B1)的氨基糖苷类抗生素,来源于Micromonospora rhodorangea,常用于筛选表达neo基因的真核或原核多克隆或单克隆细胞。G418不仅用于稳定细胞株的筛选,也用于稳定细胞株的维持。本产品的50mg/ml包装经过过滤除菌,可以直接用于细胞培养。
在细菌、酵母、原生动物、蠕虫、高等植物和哺乳动物中,遗传霉素通过抑制蛋白合成而抑制或杀死细胞。其作用机制为遗传霉素能够与70S和80S核糖体结合,从而阻断肽链延伸,干扰蛋白合成。其抗性基因(主要为neo基因)位于转座子Tn601 (903)或Tn5(来源于细菌),可以在真核细胞中表达。通过基因重组技术将这些抗性基因导入细胞,使细胞表达抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶(amino-glycoside 3’-phosphotransferase, APH(3)II),从而获得对G418的耐药性,用来筛选和维持培养携带抗性基因的原核或者真核细胞。
哺乳动物细胞中,当抗性基因neo被整合进真核细胞基因组后 ,编码表达氨基糖苷磷酸转移酶(amino-glycoside 3’-phosphotransferase, APH(3)II)。此酶通过共价修饰G418的氨基或羟基功能,抑制抗生素-核糖体间的相互作用,从而使得抗生素失活。这一特性赋予细胞产生抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长。进行稳转细胞株筛选实验时,需要建立剂量反应曲线(dose-response curve or kill curve)确定杀死无抗性细胞的最低有效浓度。
植物细胞中,通过转染携带nptII基因的抗性质粒孵育其抗性。nptII基因也能编码表达氨基糖苷磷酸转移酶,这个酶使得多种抗生素丧失活性,包括 G418,卡那霉素和巴龙霉素。
G 418与新霉素同为氨基糖苷类抗生素,都可被Neo基因产物失活,因此都可以用于筛选携带Neo抗性基因的细胞,新霉素筛选的细胞都可以用G418替代。
产品名称 | 规格 |
遗传霉素 (G418) | 1 g |
常温运输。4℃保存,有效期36个月。
本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
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